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第10章 酶促反应动力学 kinetics of enzyme—catalyzed reactions 酶促反应动力学:是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学。 影响酶速率的各种因素 1. 底物浓度 2. 酶的抑制剂 3. 温度 4. pH 5. 酶的激活剂 第一节 底物浓度对酶反应速率的影响 底物浓度对速率影响的曲线图 当底物浓度较低时，表现为一级反应（其反应速率与浓度的关系能以单分子反应的动力学方程式表示：v=dc/dt=kc （线性关系） 随着底物浓度的增加，反应表现为混合级反应。 当底物浓度达到相当高时，表现为零级反应（与底物浓度无关）。 为解释这一实验结果，Henri和Wurtz提出了酶底物中间络合物学说。该学说认为当酶催化某一化学反应时，酶首先和底物结合生成中间复合物(ES)，然后生成产物(P)，并释放出酶。反应式： S+E ES P+E 二、酶促反应的动力学方程式 1．米氏方程式的推导 （假设K4为0） k1 k3 k2 k4 对于ES的形成速度： d[ES] / dt =k1([E] — [ES]) * [S] 对于ES的分解速度： - d[ES] / dt = k2[ES] + k3[ES] 二、酶促反应的动力学方程式 当酶体系处于动态平衡时，ES的形成速度和分解速度相等 k1([E] — [ES]) * [S] = k2[ES] + k3[ES] 移项 ([E] — [ES]) * [S] / [ES] =(k2+k3) / k1 令：Km = (k2+k3) / k1 [ES]= [E]*[S] Km+[S] （1） 因为当底物浓度很高时，酶反应速率（v）与[ES]成正比，即 v = k3[ES] ,代入（1）式得： V = k3[E][S] / (Km+[S]) （2） 当底物浓度很高时所有的酶都被底物饱和而转变为ES复合物，即[E]=[ES]，酶促反应达到最大速度Vmax，所以 Vmax = k3[ES] = k3[E] （3） V = Vmax *[s] Km +[S] 米氏方程，Km米氏常数 该方程式表明：当已知Km及Vmax时，酶反应速率与底物浓度之间的定量关系。若以[S]作横坐标，v作纵坐标作图，可得到一条双曲线 1. Km值的物理意义 当反应速率达到最大速率一半时，即υ= 1/2Vmax,可以得到 [S] = Km Km值的物理意义，即Km值是当酶反应速率达到最大反应速率一半时的底物浓度，单位是mol／l。 三、Km值的意义 2. Km值是酶的一个特征常数：Km值的大小只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关。因此，在一定条件下，可以通过Km值来区别不同的酶。 Km值随测定的底物、反应的温度、pH及离子强度而改变。各种酶的Km值相差很大，大多数酶的Km值介于10-6~10-1mol/L之间。 三、Km值的意义 3. Km值可以判断酶的专一性和天然底物 有的酶可作用于几种底物，因此就有几个Km值，其中Km值最小的底物称为该酶的最适底物也就是天然底物。 Km愈小，达到最大反应速率一半所需要的底物浓度就愈小 ，底物最适。 三、Km值的意义 4. 判断反应速率v和Vmax之间的关系： 若已知某个酶的Km值，就可以计算出在某一底物浓度时，其反应速率v相当于Vmax的百分率。反之。 三、Km值的意义 5. Km值可以帮助推断某一代谢反应的方向和