果蝇精巢fasⅢ基因原核表达载体的构建.docVIP

果蝇精巢fasⅢ基因原核表达载体的构建 摘 要：果蝇fasⅢ基因是蛋白编码类基因，在精巢中fasⅢ基因主要在hub cell中表达，本实验运用基因克隆技术，以PET28a质粒为载体，选用BamHI、HindⅢ两种酶做双酶切，将目的基因fasⅢ导入质粒载体PET28a，从而构建原核表达载体PET28a-fasⅢ，再将重组质粒转化到大肠杆菌TOP10中，实现fasⅢ基因的原核表达。实验所用质粒载体用卡那抗性（Kanr ）标记，只有转化成功的大肠杆菌才能在涂有卡那霉素的LB培养基中生长。最终目的是实现fasⅢ蛋白的原核表达与纯化，为以后制备多克隆抗体奠定基础。 关键词：基因克隆；fasⅢ基因；原核表达载体；原核表达； The construction of fas III prokaryotic expression vectors Abstract: Drosophila Fas gene is protein coding gene in testis, mainly expressed in hub cell. In this experiment, by means of gene cloning technique, the target gene FasIII was inserted into the plasmid vector PET28a which was