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SEF988Ra 96T 碘甲腺原氨酸脱碘酶 Ⅰ(DIO1)检测试剂盒 (酶联免疫吸附试验法) 适用生物：大鼠 使用说明书 仅供研究使用，不用于临床诊断! 第12版 [预期应用] 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定大鼠组织匀浆、细胞裂解液或其它相关生物液体中DIO1含量。 [试剂盒内容] 试剂名称 数量 试剂名称 数量 96孔板 （预包被） 1 96孔板覆膜 4 标准品 2 标准品稀释液 1×20mL 检测溶液A 1×120μL 检测溶液A稀释液 1×12mL 检测溶液B 1×120μL 检测溶液B稀释液 1×12mL TMB底物 1×9mL 终止液 1×6mL 洗涤液 （30×） 1×20mL 使用说明书 1 [需自备的设备及试剂] 1、450±10nm滤光片的酶标仪 （建议仪器使用前提前预热） 2、单道或多道微量移液器及吸头 3、稀释样品的EP管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器 7、0.01mol/L （或1×）磷酸缓冲盐 (PBS)，pH=7.0-7.2 [试剂盒的储存及有效期] 1、 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶 液A、检测溶液B 以及96孔板保存于-20C，其余试剂请置于4C保存备用。o o 2、 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝 箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20C保存。o 注意： 试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。产 品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 [标本的采集与保存] 1、 组织匀浆：不同类型的组织制备匀浆的方法会有所不同 1） 取适量组织块，在预冷PBS （0.01mol/L， pH=7.0-7.2）中清洗去除血液，匀浆前先称重。 2）将组织切成小块，均匀的放入放置在冰上的装有新鲜裂解缓冲液(货号IS007，应依据目标蛋白的亚细胞定 位选择不同类型的缓冲液)的玻璃均质器中（微小的组织也要如此）。 （质量体积比=1:20-1:50，例如： 1mL裂解缓冲液中加入20-50mg组织样本。） 3） 将得到的悬浊液经过超声处理至澄清。 4） 将制备好的匀浆液 10,000×g离心5分钟，弃沉淀，上清即可用于检测或置于-20C下保存。o 2、细胞裂解液：在分析试验之前，细胞需利用以下方法处理： 1）贴壁细胞应该用冷PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，于1,000×g 离心5分钟后收集。 （悬浮细胞可通 过离心直接收集）。 2）将收集到的细胞用冷PBS洗3次； 7 3）将细胞用新鲜裂解缓冲液重悬至密度为 10 个细胞/毫升，如果需要，细胞可以进行超声波处理至溶液澄清。 4）将标本于2