心肌肌钙蛋白T精选.ppt

心肌肌钙蛋白T检测诊断心血管疾病研究的新进展 * 肌钙蛋白概述 肌钙蛋白检测方法 肌钙蛋白研究的新进展 高敏肌钙蛋白T的检测 * 目前临床应用的心脏标志物大致可分为三类：一类是主要反映心脏组织损伤的标志物；第二类是了解心脏功能的标志物；第三类是作为心血管炎症疾病的标志物。 反映心肌缺血损伤的标志物，如缺血修饰白蛋白、髓过氧化物酶、CD40配体，肌红蛋白、脂肪酸结合蛋白、糖原磷酸化酶BB同工酶等；心肌组织损伤坏死的确定标志物，如心肌肌钙蛋白等。而AST、乳酸脱氢酶（LD）及其同工酶和β-羟丁酸脱氢酶等因灵敏度和特异性都相对较差，在心肌损伤的诊断检测中已不再应用或逐步停用。心肌肌钙蛋白（cTn）是目前临床敏感性和特异性最好的心肌损伤标志物，已成为心肌组织损伤（如心肌梗死）最重要的诊断依据 . * 肌钙蛋白概述 肌钙蛋白检测方法 肌钙蛋白研究的新进展 高敏肌钙蛋白T的检测 * 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白 ,由心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTn I）和肌钙蛋白C（TnC）组成 . 肌钙蛋白T（TnT）分子量为 37KD，有三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白T（sTnT）包括快骨骼肌型和慢骨骼肌型，此外还有心肌型。大部分是以复合物形式存在于细丝上，6%—8%以游离的形式存在于心肌细胞浆中。 TnI（肌钙蛋白I）分子量为 26.5KD,存在三种亚型：快骨骼肌型和慢骨骼肌型，心肌型 。 * 肌纤维由平行的粗丝和细丝组成网状结构。粗丝是肌球蛋白复合体；细丝由肌动蛋白，原肌球蛋白和肌钙蛋白组成 。 肌钙蛋白在骨骼肌和心肌中广泛存在: 肌钙蛋白C结合Ca离子 – 存在于骨骼肌和心肌 肌钙蛋白I是肌动蛋白抑制亚基 – 仅存在于心肌中 肌钙蛋白T是原肌球蛋白结合亚基, 推动肌肉收缩–仅存在于心肌中 心 肌 纤 维 * cTnT的释放动力学　 cTnT血清半衰期仅120 min，但AMI患者其血清cTnT浓度升高可持续几天至3周，最长达27 d，平均300 h。心肌细胞内存在游离的胞浆cTnT池和结构上与肌原纤维结合的cTnT池，前者约5%，后者约95%。在心肌细胞受到可逆性损害时，细胞膜的完整性被破坏，游离的cTnT首先释放入血液中，构成短暂而迅速的升高峰。如发生不可逆的心肌细胞损伤，结合部分的cTnT继续从细肌丝上降解下来，导致血清cTnT持续性的升高。 * 急性心肌梗死(MI)后心脏标志物的分泌心脏标记物升高量与心肌坏死程度成正比 French J and White H Heart 2004; 90(1): 99–106. * 肌钙蛋白概述 肌钙蛋白检测方法 肌钙蛋白研究的新进展 高敏肌钙蛋白T的检测 * 肌钙蛋白的检测方法 免疫学方法 1.酶联免疫吸附实验（ELISA） ELISA法由于存在灵敏度偏低、CV值偏大等原因，已经逐步被淘汰； 2.金标 金标免疫法标本用量少、简单快速，适用于急性心梗（AMI）的床旁检测，不受时间、地点限制，但结果只能定性，并受主观因素影响。而且金标免疫法检测的灵敏度低，检测范围窄，检测范围仅为0.1~2.0μg/L 。 3.化学发光及电化学发光等 目前临床检测cTn广泛采用全自动化学发光免疫分析法，此方法使用单克隆抗体，以全自动检测设备取代手工操作，使检测的重复性和可靠性大幅度提高，分析灵敏度可达0.01μg/L，并且该方法检测时间短。 * 制作工艺的不断进步，使得肌钙蛋白的检测水平不断提高 第一代 1989年 ELISA Troponin T 第一代心脏特异性单克隆抗体 第二代 1993年 Enzymun TroponinElecsys Troponin T 第二代心脏特异性单克隆抗体 （定标液：牛肌钙蛋白） 第三代 1996年 Elecsys? Troponin T 第二代心脏特异性单克隆抗体 （定标液,人基因重组肌钙蛋白） 第四代 2005年 Elecsys?Troponin T 不受肝素干扰 第五代 2010年 Elecsys? Troponin T–hs 最低检测浓度: 0.003 ng/ml 第99百分位数: 0.014 ng/ml10% CV: 0.013 ng/ml * 血清cTnT检测比常规的心肌酶检测有几个明显的优点： ①灵敏性高，在正常血清中呈阴性，有微小心肌细胞损伤就可检出。 ②特异性好，尤其在并发有骨骼肌损伤的AMI患者诊断中，效果更好。 ③诊断窗口宽，在AMI后血清中释放持续时间长，即使是亚急性期MI仍可进行血清学检测。 ④应用范围广，可以更好地预测AMI后患者的心功能状况、梗死范围，判断预后及冠脉再通疗效；监测UAP患者的预后，及早进行干预，防止发生AMI等心脏事件；并可监测心血管疾病介入治疗中对心肌细胞的损伤程度。