抗猪繁殖与呼吸综合征病毒卵黄抗体的制备及临床应用.pdf

抗猪繁殖与呼吸综合征病毒卵黄抗体的制备及临床应用 崔焕忠，姜海龙 ，张加力，秦贵信 ，张 辉 ，郑 鑫 (吉林农业大学 动物科技学 院，吉林长春 130118) 摘 要 ：制备猪繁殖与呼吸综合征病毒高免卵黄抗体 ，研究其治疗效果。以猪繁殖与呼吸综合征灭活苗 免疫产蛋鸡，采用ELISA方法检测卵黄抗体效价 ，收集高效价卵黄 ，采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化 卵黄 抗体 。ELISA方法测定收集抗体效价为 1：8000，测定纯化的抗体浓度为7．85mg／mL，微生物学检验及安 全性试验表明制备的卵黄抗体安全可靠，人工感染治愈率和临床应用治愈率分别为 100 和 89．1 ，表 明制 备 的卵黄抗体对猪繁殖与呼吸综合征具有显著的治疗效果 。 关键词 ：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ；卵黄抗体 ；临床应用 中图分类号 ：$852．659．2 文献标识码 ：B 文章编号 ：1007—5038(2012)05—0125—03 猪繁殖与呼吸综合征 (Porcinereproductiveand 1 材料与方法 respiratorysyndrome，PRRS)是 由猪繁殖与呼吸综 1．1 材料 合 征 病 毒 (Porcinereproductiveandrespiratory 1．1．1 病毒及疫苗 猪繁殖与呼吸综合征病毒 由 syndromevirus，PRRSV)引起的以母猪繁殖 障碍和 吉林农业大学临床兽医学研究室保存 ；猪繁殖与呼 仔猪呼吸道症状为特征的一种接触性传染病，该病 吸综合征灭活苗购 自上海海利生物药品有限公司。 1987年在美国首次发生，并于 1996年传人我 国，目 1．1．2 主要试剂 氯仿、硫酸铵等为 国产分析纯； 前在 国 内很 多养 猪密集地 区均有 发病报道L1]。 蛋 白定量试剂盒购 自华特生生物技术有限公司；猪 PRRS的主要临床特征为流产 ，产死胎、木乃伊胎、 繁殖与呼吸综合征免疫金试纸条购 自深圳康百德生 弱胎，呼吸困难 ，耳尖发绀。各种年龄 、品种的猪均 物有限公司；猪繁殖与呼吸综合征抗体检测试剂盒 易感染 ，以妊娠母猪和哺乳仔猪最为易感 ，哺乳期仔 购 自无锡同昕生物技术有限公司；兔抗鸡 IgY酶标 猪感染死亡率高达 6O ，目前 尚无有效 的防治方 二抗购 自郑州益康生物有限公司。 法l2j。近几年，该病在国内呈现 明显的高发趋势 ，给 1．1．3 试验用动物 150日龄健康海兰褐产蛋鸡 ， 养猪业造成 了重大损失 ，已成为严重威胁我 国养猪 健康昆明小 鼠，购 自长春市宏达动物养殖场，1日龄 业发展的重要传染病之一 。卵黄抗体是产蛋鸡经免 未吃初乳仔猪购 自长春市某猪场。 疫刺激后 ，机体分泌的特异性抗体进入血液循环，当 1．2 方法 血液流经卵巢时，特异性抗体 (主要是 IgY)在卵细 1．2．1 动物免疫 以猪繁殖与呼吸综合征灭活苗 胞中逐渐蓄积，形成卵黄抗体 。卵黄抗体 的作用机 为免疫原，免疫健康产蛋鸡。第 1次免疫剂量为 1 理与母源抗体相似 ，都是 以被动免疫 的方式使机体 mL，胸部皮下多点注射 ；分别间隔 2周进行第 2次 获得免疫力 ，目前广泛用于疾病 的诊断与防治。 免疫和第 3次免疫 ，免疫剂量分别增加为 1．5mL和 本试验以猪繁殖与呼吸综合征灭活苗为免疫抗 2mL，免疫途径相 同；第 3次免疫 10d后进行第 四 原，免疫产蛋鸡 ，收集高效价卵黄并进行分离纯化 ， 次免疫 ，免疫剂量为 4mL，于颈部和胸部皮下多点 对制备的卯黄抗体治疗猪繁殖与呼吸综合征感染的 注射 引。 效果进行了研究