茶多糖分离纯化.ppt

茶多糖的提取纯化及其生物活性研究进展 茶 我国现有茶园面积110万公顷。茶区分布辽阔，共有21个省967个县、市生产茶叶。全国分四大茶区：西南、华南、江南和江北茶区。 茶多糖 有机化学成分主要有：茶多酚类、植物碱、茶多糖、蛋白质、氨基酸、维生素、果胶素、有机酸、色素等。 茶多糖的生物活性 茶多糖的生物活性 具防辐射、提高机体免疫力，抵抗重金属攻击，解毒，保护肝脏，降血糖、降血脂、抗肿瘤和癌症等。 茶多糖的分离纯化 茶多糖提取 超声波提取茶多糖 超声波也常被用于辅助多糖的提取，超声振荡可直接破坏植物的细胞壁，使通过细胞多孔透析膜的可溶性物质增加，提高多糖得率。 采用超声波法对金花茶多糖进行提取，选择料液比、时间、温度、超声波频率这 4 个工艺参数进行 了单因素实验，并通过正交实验确定了提取的最佳工艺条件：即料液比1:50、提取温度 80 ℃、时间 1h 、 超声波频率 5 3.2kHz ，在该条件下金花茶多糖的得率为3.1％。比传统提取方法金花茶多糖得率提高1％。 除蛋白 sevag法：条件温和，可避免多糖的降解，缺点是一次 只能除去少量蛋白质，一般4、5次方能除尽，多糖因多次除蛋白而损失。 三氟三氯乙烷法：效率较高，但因其易挥发，不宜大量应用。 三氯乙酸法：较为剧烈，会引起某些多糖的降解，得率降低。 色谱层析法：可能更能保持茶叶中糖蛋白复合物的生物活性。并且，在采用色谱层析脱除杂蛋白的同时，也将茶多糖进行了分离纯化。 除色素 金属络合法：采用一些重金属铁和铜、铅等沉淀茶多糖，从而使茶多糖和一部分色素相分离，然后再用阴离子交换树脂分解络合物。 氧化法：常采用H202，虽有一定的脱色作用，但对茶多糖有降解。 离子交换法：在溶液中色素分子带负电荷，可用弱碱性阴离子树脂（DEAE纤维素）吸附色素，还兼分离的作用。 物理吸附法：常用活性炭、大孔吸附树脂作为吸附剂。大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂，具有大孔网状结构和较大的比表面积，可通过物理吸附从水溶液中选择性的吸附有机物，作用条件比较温和。 茶多糖的分离纯化 分级沉淀法：适宜于分离各种溶解度相差较大的多糖。 季胺盐沉淀法：长链季胺盐能与酸性多糖成盐形成水不溶性化合物，此法可分离酸性及中性多糖。 膜分离：透析除去少量有机溶剂、单糖和寡糖等。 超滤法：筛选溶液中不同分子量的组分。茶多糖粗品中有较强活性部分的相对分子质量约在4×104 ～10×104 之间，膜孔径可选用相对分子量在此区间的的膜系统。 柱层析：阴离子交换柱层析法；凝胶柱层析。 阴离子交换柱层析法 阴离子交换色谱法，常用的交换介质有DAEE一纤维素、DEAE一葡聚糖、DEAE一琼脂糖等，此法适合于分离各种酸性、中性和粘性活性多糖。在pH=6.0时，酸性多糖能吸附于交换介质上，中性多糖不能吸附，然后用pH相同但离子强度不同的缓冲溶液将酸性强弱不同的酸性多糖分别洗脱下来。 凝胶柱层析 凝胶柱层析可将多糖按分子大小和形状不同分离开来，常用的凝胶有葡聚糖凝胶(Sephadex)及琼脂糖凝胶(Sepharose)。常用的洗脱剂是各种浓度的盐溶液及缓冲液，茶多糖分离时多选用Sephadex G-50～100型，工作范围在相对分子量为500～2×l05。一般先用Sephadex G-50以分离相对分子量在1万以下的各组分，然后选用Sephadex G-150-200以达到进一步纯化的目的。 茶多糖的化学结构特征 茶叶中的多糖有中性多糖、酸性多糖，而且往往是与蛋白质紧密结合糖蛋白复合物。但现有的对茶多糖组成的报道各不相同，有的单糖组成、摩尔比和分子量差异甚至很大。 茶多糖研究进展 多糖结构与功能关系至今仍是多糖研究的薄弱环节，大多还是科学家们的分析和推测，而多糖活性与二级乃至三级结构的关系更为密切，因此研究多糖的立体构型更有利于阐明多糖的构效关系，而我国多糖研究现仅局限于用经典的化学方法来测定其一级结构。另外多糖的合成也较复杂和困难，并且多糖在体内的作用机制还未十分明了。因此对茶多糖结构的深入研究是基础，也是今后茶多糖研究的的重中之重。 Thank you Company Logo * LOGO Add Your Company Slogan 陆羽《茶经》云：“茶之饮在于解毒、消食、清心、益思、少睡眠”。 茶属于山茶科，为常绿灌木或小乔木植物，植株高达1-6米。茶树喜欢湿润的气候。 茶 茶多糖 增强免疫 抗氧化 茶 多 糖 抗血凝、 抗血栓 降血糖 降血脂 硒茶多糖，香菇 多糖，番茄红素 茶多糖的分离纯化 茶多糖的化学结构特征