动物细胞培养1课件.pptVIP

Bio.sdedu.net 刀锋课件 Bio.sdedu.net 刀锋课件 复习提问 1、植物细胞工程的实际应用包括哪三方面？ 2、微型繁殖的概念、优点？ 3、作物脱毒选择什么部位、什么细胞、原因？ 4、人工种子的组成？人工种皮中应加入什么成分？ 5、人工种子与天然种子相比有何优点？ 6、单倍体育种的过程、优点？ 7、细胞产物的工厂化生产利用了植物组织培养的哪一阶段的产物？ 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 其它动物细胞工程的基础 学习目标 理解并熟记动物细胞培养的原理、过程及条件 举例说明动物细胞培养的应用 　　2003年４月７日下午，12岁 的四川简阳少年小林放学路上捡了 些鞭炮，将其点燃，导致面部、四 肢被严重烧伤并感染。为了挽救儿 子的生命，小林的爸爸、妈妈向医 生恳求：“割我们的皮给儿子吧！” 烧伤整形科主任魏平经不起这份亲 情的重托，最终“妥协”了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。为了完全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生决定把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的小皮块，儿子的剪成正方形，爸爸的剪成三角形，往需要植皮的创面上放时，儿子和爸爸的皮相隔相嵌 。12时许，植皮手术成功完成。估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来生机，孩子的痊愈指日可待。 儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤 思考一下！ 1、小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？ 2、选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？ 3、自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？ 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的______,将它分散成_________,然后,放在适宜的_____________中,让这些_____________________。 3、原理： 1、概念： 细胞增殖 2、起点： 止点： 组织细胞 细胞 组织 单个细胞 培养基 细胞生长和增殖 读教材44页第五段，回答动物细胞培养的相关问题。 结合图示试用文字和箭头表示其过程 胰蛋白酶处理 取动物组织块 剪碎 单个细胞 细胞悬液 原代培养 传代培养 二、过程 1、取材时一般选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料，原因是什么？ 因为上述材料细胞分化程度低，分裂增殖能力强 2、动物细胞培养前对取出的动物组织要做怎样的 处理？处理目的是什么？ 剪碎并用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间 目的是使组织块分散成单个细胞。 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 扩大细胞与培养液的接触面积，利与细胞吸收 营养和排出代谢废物。 4、细胞培养用胰蛋白酶处理说明细胞间的物质是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？ 细胞间的物质是蛋白质；不可以；因为动物细胞培养的最适PH值为7.2-7.4，胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃蛋白酶适宜PH为2，胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养液中无活性。 5、胰蛋白酶会把培养的细胞消化掉吗？为什么？ 会，胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外， 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损 伤作用，因此，必须控制好胰蛋白酶的消化时间 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 瓶壁上的细胞层数为单层 原代培养 动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养： 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶处理然后分 瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程 叫传代培养 1、为什么要进行传代培养？ 因为细胞出现接触抑制 3、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代 以内，为什么？ 2、传代培养中，第10代细胞与第50代以后细胞的 主要区别是什么？ 50代以后的细胞，遗传物质发生了改变，带有 癌变的特点，失去接触抑制的特性 10代以内的细胞遗传物质不改变，保持正常 二倍体核型。 胰蛋白酶处理 剪碎 单个细胞 细胞悬液 原代培养 传代培养 二、总结过程 动物胚胎或 幼龄动物的 组织、器官 原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变） 继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 分化程度低， 分裂增殖能 力强 便于吸收营养物质 排出代谢废物 接触抑制 2、动物细胞培养能否像植物组织培养那样 最