基因工程第一讲-绪论课件.pptVIP

Introduction Genetic engineering Gene manipulation Gene cloning Recombinant DNA technology Genetic modification New genetics 尽管由于Morgan及其学派的出色工作，使基因学说得到了普遍承认，但是直到1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋模型之前，人们对于基因的理解仍然是抽象的、概念化的，缺乏准确的具体内容。 当时科学家不但没有探明基因的结构特征，也不能解释位于细胞核中的染色体和基因是怎样控制显然发生在细胞质中的各种生化过程的，更不能理解基因是怎样在细胞繁殖过程中准确地复制和遗传的。 细菌的转化: 早在1928年英国科学家Griffith等人就发现肺炎链球菌使小鼠死亡的原因是引起肺炎。 细菌的毒性（致病力）是由细胞表面荚膜中的多糖所决定的。荚膜多糖能保护细菌免受动物白细胞攻击。 具有光滑外表的S型肺炎链球菌因为带有荚膜多糖而能使小鼠发病. 而具有粗糙外表的R型因为没有荚膜多糖而失去致病力。 S型可以使R型转化为S型。 二十世纪四十年代，人们终于明确地了解了这种传递遗传信息的分子是DNA。 1944年，O. T. Avery等人证明DNA是遗传信息携带者。 1952年，A. D. Hershey和M. Chase证明了T2噬菌体的遗传物质是DNA。 S型菌体→小鼠死亡 死S型菌体（煮杀）→小鼠存活 R型菌体→小鼠存活 死S型菌体＋活R型菌体→小鼠死亡，并发现这些小鼠体内有S型菌体。 抗虫棉花： 目前使用的抗虫基因主要有三种： ①苏云金杆菌（Bacillus thuringicnsis）杀虫结晶蛋白基因，也即Bt基因； ②从植物中分离出的昆虫的蛋白酶抑制剂基因，其中应用最广泛的是豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI； ③植物凝集素基因（lectin gene）。 植物抗病毒基因工程 病毒外壳蛋白（CP）基因 病毒复制酶基因 病毒卫星RNA 反义RNA，RNA干扰技术 核酶，riboxyme 运动蛋白 抗除草剂基因工程 草甘膦是使用最普遍的除草剂之一，其商业名称为Roundup和Tumbleweed。 该除草剂可以抑制一种芳香族氨基酸生物合成酶，称为5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶（EPSPS）。 抗除草剂转基因大豆------食用植物油 抗性植物可以通过以下途径获得： 1，导入额外的EPSPS基因拷贝来增加EPSPS合成能力。 2，使用与植物EPSPS稍微不同的细菌的EPSPS基因（编码产物对草甘膦具有抗性）。 其他抗除草剂基因： bar基因：抗草丁膦 bxn基因：腈水解酶基因, 抗除草剂溴苯腈。 tfdA基因：2,4-D单氧化酶基因，降解2,4-D。 植物基因工程中使用的bar基因可以编码草丁膦乙酰转移酶（phosphinothricin(PPT) acetyltransferase），该酶可以使植物对除草剂Basta?产生抗性； pat基因功能与bar基因一样，它与bar基因的区别为：bar基因分离自Streptomyces hygroscopieus，而pat基因分离自Streptomyces viridochromogenes。 基因工程与环境污染的治理：芳香族化合物降解质粒（degradative plasmid）： 携带有分解或降解某种芳香族化合物为简单化合物或无机物的酶系基因的质粒，赋予宿主细胞降解某种芳香族化合物的能力。 降解性质粒只在假单胞菌属（Pseudomonas ）中发现。这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解 CAM（樟脑）、OCT（辛烷）、XYL（二甲苯）、NAH（萘）质粒等。 opd基因，编码对硫磷酶，有机磷分解酶 能源开发： 丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase, PDC, EC4.1.1.1)和乙醇脱氢酶Ⅱ(alcohol dehydrogenaseⅡ, ADHⅡ, EC 1.1.1.1)可以将丙酮酸定向的转化成乙醇。 大肠杆菌可以代谢木质纤维素中的五碳糖和六碳糖,但是缺乏丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶Ⅱ,乙醇产量很低。 将酵母的pdc、adhB基因转入大肠杆菌，每升发酵液可产生40克乙醇。 正如克隆动物研究要有足够的卵细胞（egg cell）以供体细胞核的显微转移一样，基因工程研究需要有大量功能明确的目的基因，因此基因工程上游工作更为重要。 Genome-----单倍体所具有的全部遗传信息。 人基因组包括：22条常染色体 + X + Y molecular agriculture--指在大肠杆菌（ E. coli ）等宿主细胞中扩增基因或DNA片段。 Genethics-----