antirantes联合环孢素a诱导小鼠二次心脏移植长期免疫耐受word格式论文.docxVIP

目录附录 ………………………………………….…………………………....4 中文摘要 ………………………………………….………………………5 英文摘要 ………………………………………………….………………7 前言 …………………………………………………….…………………9 材料与方法 ...............................................................................................12结果 .............................................................................................................16讨论 ..............................................................................................................20结论 ……………………………….…………….....................……………24 参考文献 …………………………………………………..………………26 综述及参考文献…………..….……….................….………………….........29 致谢 ……………………………………………….………………….……37中英文缩词略表QRT-PCRQuantitative Real Time PCR实时定量 PCRIFN-γInterferon-γγ 干扰素ILInterleukin白介素TGFTransforming growth factor转化生长因子ARAcute rejection急性排斥反应CsACyclosporine A环孢素 ACCR5CC chemokine receptor5CC族趋化因子受体5 ISHLTInternational Society for Heart and国际心肺移植协会Lung TransplantationAnti-RANTES联合环孢素A诱导小鼠二次心脏移植长期耐受【摘要】目的 探讨Anti-RANTES联合环孢素A在小鼠心脏二次移植急性排斥反 应中的作用。方法构建小鼠心脏二次移植模型：初次移植，以Balb／c小鼠为 供鼠，C57BL/6小鼠为受鼠，进行腹部心脏移植；二次移植，以同种Balb／c小鼠 为供鼠，初次移植后存活的C57BL/6小鼠为受鼠，进行二次颈部心脏移植。然后 经不同步骤处理，分为四组进行实验：对照组：初次腹部心脏移植存活小鼠，于 初次腹部心脏移植2w后行二次颈部心脏移植,同时予腹腔注射与其他组同剂量的 生理盐水处理；实验组A，初次腹部心脏移植存活小鼠，于初次腹部心脏移植2w 后行心脏二次颈部移植，同时予腹腔注射与其他组同剂量的环孢素A处理（n=6）； 实验组B，初次腹部心脏移植存活小鼠，于初次腹部心脏移植2w后行心脏二次颈 部移植，同时予腹腔注射与其他组同剂量的Anti-RANTES处理（n=6）；实验组C， 初次腹部心脏移植存活小鼠，于初次腹部心脏移植2w后行心脏二次颈部移植， 同时予腹腔混合注射与其他组同剂量的环孢素A和Anti-RANTES处理（n=6）。观 察四组二次移植心脏存活时间;HE染色组织病理学改变观察各组异位心脏急性 排斥反应的程度;Q-PCR检测二次心脏移植物中RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10 和 TGF-β基因的相对表达量;ELISA检测RANTES、IFN-γ、IL-2、IL-10 和TGF- β在受鼠血清中的浓度。结果 在Anti-RANTES联合环孢素A实验组，移植心脏 的存活时间可达8.58±0.24天，而在对照组、Anti-RANTES组和应用环孢素A组， 移植心脏的存活时间分别为(3.1±0.43)、(5.2±0.26)和(5.58±0.20)天(P0．01)； 心脏移植物HE染色可见，在Anti-RANTES联合环孢素A实验组，其炎症细胞的浸 润较对照组、单用Anti-RANTES实验组A、单环孢素A实验组B明显减少(P0．01)； Q-PCR 的 结 果 提 示 ， 移 植 心 脏 内 RANTES 、 IL-2 、 INF- γ的 mRNA 表达在 Anti-RANTES联合环孢素A实验组较其他组明显减少，而移植心脏内IL-10、TGF- β mRNA 的表达在 Anti-RANTES 联 合 环 孢 素 A 实 验 组 较 其 他 组 明 显 增 加 (P0．01)；ELISA的结果提示，移植心脏内RANTES、IL-2、INF-γ的血清浓度 在Ant