balbc小鼠间变性大细胞淋巴瘤模型的建立及体液免疫机制探讨word格式论文.docxVIP

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balbc小鼠间变性大细胞淋巴瘤模型的建立及体液免疫机制探讨word格式论文

BALB/c小鼠间变性大细胞淋巴瘤模型的建立及体液免疫机制的探讨中文摘要目的:构建BALB/c小鼠间变性大细胞淋巴瘤的动物肿瘤模型,并初步探讨其体液免疫功能的作用。方法:①培养人间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas-299,将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺对照组、移植组;②环磷酰胺对照组及移植组BALB/c小鼠注射环磷酰胺(250mg/kg/只)预处理;③移植组小鼠在环磷酰胺预处理3 天后将ALCL 细胞悬液经皮下注射到体内,建立ALCL小鼠肿瘤模型,观察小鼠成瘤情况,根据成瘤情况分为移植未成瘤组及移植成瘤组;④处理后24天后取肿瘤组织进行常规HE 染色及免疫组织化学染色鉴定以及取各组小鼠外周血行ELISA分析IL-2、IL-4、IgM、TNF-β、TGF-β、sCD30 细胞因子的变化情况。结果:1.环磷酰胺预处理后,小鼠存活率100%,移植细胞后存活小鼠成瘤率80%;2.肿瘤组织行HE染色,病理组织学结果为恶性淋巴瘤。其特点为:肿瘤细胞形态多样化,体积较大,胞浆丰富,核仁明显浅染、偏心,呈马蹄形、卷曲不规则,可见细胞核分裂象,部分肿瘤组织伴有坏死。免疫表型特点:CD30、ALK 阳性,CD20阴性,染色结果符合间变性大细胞淋巴瘤免疫表型。3. ELISA检测:①与空白组相比:环磷酰胺对照组TNF-β 含量降低(P0.05),余指标无差异(P0.05)。移植未成瘤组IL-2、TNF-β,sCD30、IgM 含量升高(P0.05),IL-4、TGF-β 含量无差异( P0.05),移植成瘤组IL-2 含量降低(P0.05),余指标升高(P0.05);②与CTX24 组相比:IL-2、TNF-β 含量升高(P0.05),IL-4、IgM、TGF-β、sCD30 含量无差异( P0.05);移植成瘤组IL-2含量降低(P0.05),余指标含量升高(P0.05);③与移植组未成瘤相比:移植成瘤组小鼠IL-2 含量降低(P0.05),余指标含量均增高(P0.05)。结论:1.在具有正常免疫功能的小鼠上成功构建了ALCL肿瘤模型;2.对BALB/c 小鼠给予免疫抑制剂药物环磷酰胺的预处理,使得小鼠机体产生免疫耐受,为后续移植ALCL肿瘤细胞后肿瘤的发生发展提供了优势基础条件。3.通过正常组、环磷酰胺对照组、移植成瘤组小鼠相关细胞因子检测结果分析:肿瘤构建过程中,肿瘤细胞可2能通过诱导提高免疫抑制细胞因子TNF-β,sCD30、IL-4、TGF-β表达,降低免疫细胞因子IL-2表达,达到抑制机体抗肿瘤效应,躲避免疫攻击,从而促进肿瘤生长、侵润。关键词:BALB/c小鼠;间变性大细胞淋巴瘤;ELISA;CD30;3Astudy forImmunological mechanisms of human anaplastic large celllymphomaonBALB/c mice tumormodelAbstractObjective: To build animal tumor model of anaplastic large cell lymphoma andinvestigatethepathogenesisofhumoralimmunologyoftumoronBALB/cmicewith immune ability.Methods:1.Humananaplasticlargecell lymphomacelllineKarpas-299werecultivated.2.TheBALB/cmicewererandomlydividedintocontrolgroup,cyclophosphamidegroup andtransplantationgroup.Thecyclophosphamidegroupandtransplantationgroup BALB/cmicewerepretreatedbyinjectingwithcyclophosphamide(250mg/kg/only).3.To constructALCLmousetumormodel,thecultivatedtumorcellwereimplantedintothe BALB/cmicewiththesubcutaneousinjectionafterbeingpretreated3dayslater. Accordingtotumorformationinbody,thetransplantedtumorweredividedintotumor groupandunpairedtumorgroup.4.Afterimplantation24days,RoutineHEstainingand immunohistochemicalsta

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