dbdb2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌 产甲烷短杆菌与glp1的相关性分析word格式论文.docxVIP

中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名T2DMType2DiabetesMellitus糖尿病IRInsulinResistance胰岛素抵抗GLP-1Glucagon-likepeptide1胰高血糖素样肽1FBGfastingbloodglucose空腹血糖ELISAenzyme-linked immunosorbentassay酶联免疫法RT-qPCRreal-time quantitativePCR实时荧光定量PCR16SrRNA16SribosomalRNA gebe16S核糖体RNA编码基因DGGEDenaturinggradientgel electrophoresis变性梯度凝胶电泳SCFAshort-chainfattyacids短链脂肪酸SRBsulfate-reducingbacteria硫酸盐还原菌LBPLPS-binding proteinLPS结合蛋白TLR4Toll like receptor4Toll样受体目录摘要………………………………………………………………………………1ABSTRACT………………………………………………………………………2前言………………………………………………………………………………4材料与方法………………………………………………………………………6 1.材料…………………………………………………………………………61.1 动物……………………………………………………………………61.2 主要试剂………………………………………………………………61.3 主要仪器………………………………………………………………72.方法…………………………………………………………………………82.1 样本采集及处理………………………………………………………82.2标准菌的复苏、培养和冻存…………………………………………82.3 2 型糖尿病模型组db/db和对照组db/m小鼠体重和血糖的观测82.4 多形拟杆菌、产甲烷短杆菌数量的检测…………………………82.5 GLP-1 的分泌和功能的检测…………………………………………122.6门脉血、结肠匀浆液中LPS的水平用酶联免疫法(ELISA)检测…15结果………………………………………………………………………………16讨论………………………………………………………………………………38小结………………………………………………………………………………45致谢………………………………………………………………………………46参考文献…………………………………………………………………………47综述………………………………………………………………………………53攻读硕士学位期间发表的学位论文……………………………………………62导师评阅表………………………………………………………………………63db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与GLP-1的相关性研究研究生：易金阳导师：李琳琳教授摘要目的：研究db/db 2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌与胰高血糖素样肽1（GLP–1）相关性，探索多形拟杆菌、产甲烷短杆菌对糖尿病影响的可能机制。方法：用6 周龄2 型糖尿病模型组db/db(n=6)和对照组db/m(n=6)小鼠，观察第7周到第12周中两组小鼠的体重、空腹血糖水平；第12周之后，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法测定肠道多形拟杆菌、产甲烷短杆菌的数量，其中以绝对与相对定量两种方式对多形拟杆菌进行检测，比较两种定量方式手段的差异；运用酶联免疫法（ELISA）测定门脉血和结肠组织匀浆液中GLP-1的水平来反映GLP-1的分泌，运用RT-qPCR和ELISA分别测定GLP-1R的表达，血清中C肽的水平来反映GLP-1 的功能。结果：1. 与对照组db/m 相比，第7 周到第12 周的观察过程中模型组db/db 小鼠体重增加（P＜0.01），空腹血糖升高（P＜0.01），并且出现血糖与粪样中多形拟杆菌呈正相关的变化。2. 与对照组db/m组相比，模型组db/db小鼠结肠中多形拟杆菌、产甲烷短杆菌的数量增加（P＜0.05），并且以绝对与相对定量两种方式对多形拟杆菌进行检测，没有统计学意义(P＞0.05)。3. 与对照组db/m 组相比，模型组db/db小鼠门脉血、结肠组织匀浆液中GLP－1水平降低(P＜0.05)。4.与db/m 组相比，模型组db/db小鼠胰腺、结肠组织GLP-1R受体表达匀是下调(P＜0.05)和血清中C肽降低(P＜0.05)。5.模型组db/db小鼠结肠内容物多形拟杆菌数量与门脉血、结肠GLP-1 含量（r＝－0.63, P＜0.01; r＝－0.35, P＜0.01）和胰腺