首款肺癌全自动免疫组化伴随诊断试剂盒在华获批上市精选.doc

首款肺癌全自动免疫组化伴随诊断试剂盒在华获批上市 有效识别ALK蛋白表达 实现肺癌患者个体化治疗 肺癌是全球排名第一位的肿瘤杀手。与30年前相比，我国肺癌死亡率上升了465%[1]，发病率高居榜首。肺癌通常分为非小细胞肺癌（Non-small-cell carcinoma，NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC）。其中NSCLC占了肺癌的85%。 随着肿瘤分子生物学的进展，临床上对NSCLC的认识正不断深入。研究表明，50% NSCLC的发生是由于一系列的驱动基因，包括EGFR，KRAS，ALK，MEK，PI3K，BRAF等。找到驱动基因，再进行针对性用药，NSCLC治疗就能事半功倍。研究人员发现，胰岛素受体家族的成员——间变性淋巴瘤激酶（ALK）是NSCLC的关键启动癌基因。在NSCLC患者中，虽然只有5%[2] [3] [4]的患者会出现ALK基因重排，但是中国每年新发病例数仍接近35,000例[5]。由于ALK阳性NSCLC具有明确的分子靶点、靶点检测技术以及上市的靶向药物，通过准确诊断ALK基因重排， ALK阳性患者可从酪氨酸激酶抑制剂（克唑替尼）治疗中获益，明显提高临床疗效。 从组织学分型上，还有肺腺癌和肺鳞癌之分。由美国病理协会、国际肺癌研究协会、分子病理协会出台的《肺癌分子标志物检测指南2013》明确指出：所有含有腺癌成分的NSCLC均需检测ALK。今年6月，由中国临床肿瘤学会肿瘤生物标志物专家委员会出台的《中国间变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性非小细胞肺癌诊断专家共识（2013版）》（简称《共识》）指出：对于潜在怀疑存在ALK基因融合变异的患者均可进行ALK融合基因检测。 在第七届中国病理医师年会期间，罗氏诊断举办了“ALK在NSCLC中的诊断与经验分享”卫星会，全国知名病理专家就ALK检测方法、最新标准化的ALK免疫组化检测判读指南等内容进行了探讨。 ALK融合基因的检测方法 根据《共识》，荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization, FISH）、基于PCR扩增基础上的技术和免疫组织化学法（immunohistochemistry, IHC）均可作为针对ALK融合基因检测常用的方法，实验室可以根据组织标本类型选择合适的检测技术。 由于大部分克唑替尼治疗ALK阳性NSCLC的临床试验均是基于FISH的诊断，因此，FISH检测目前仍是确定ALK融合基因的参考标准方法。但是，由于FISH检测对于操作和判读技术的要求很高，只有FISH操作经验丰富的医师判定的结果才具有可靠性；而且晚期NSCLC患者通常只能提供2mm左右的小活检组织，因此很难保证每个视野存在50个以上的癌细胞供结果判读；而且暗视野下无法获得完整的组织形态学结构。FISH检测结果要求≥15%的判断界值（cut off）也存在商榷之处，研究结果显示少数ALK FISH检测阴性、IHC检测阳性的患者也能从靶向药物中获益。同时，目前FISH检测的成本昂贵，且不能明确ALK融合基因的具体融合变体。因此，在现阶段，FISH检测尚无法适用于中国ALK阳性NSCLC患者的大规模筛查和诊断。 基于PCR扩增基础上的RT-PCR法检测ALK融合基因的特点在于快速、简便易行，能同时明确ALK基因已知的融合变体的类型。但是，该方法对于RNA提取的质量要求较高，国内部分实验室未具备严格的质量控制条件。此外，无法检测未知的融合型是其最大的不足之处，限制了其在ALK诊断中的应用。 早期的ALK融合蛋白的IHC抗体敏感性较低，因此不适宜用于ALK融合蛋白的检测。随着技术的改进， 罗氏诊断VENTANA ALK IHC检测特异性的提高了检测灵敏度，同时采用全自动化操作，使检验流程和结果判读都得以标准化，可实现与FISH结果高度一致性，结果判读的可重复性为99.7%，为ALK检测的临床广泛应用带来了巨大的突破。 图1：ALK检测方法比较 首款全自动IHC检测获认可 VENTANA ALK IHC检测是唯一获得欧盟认证的用于识别适合克唑替尼治疗的患者的体外诊断IHC检测，已在全球超过53个国家销售。日前，该检测获得了中国国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准在华上市。该项批准基于一项囊括了北京肿瘤医院、中国医学科学院肿瘤医院、复旦大学附属肿瘤医院的1,100个中国患者的回顾性研究，证明了VENTANA ALK IHC检测与雅培Vysis ALK Break Apart FISH 探针试剂盒的一致性达99.23%。 VENTANA ALK IHC技术平台方法使用了基于非内源性半抗原、信号扩增多聚体和辣根过氧化物酶系统的染色信号放大技术。在不影响检测特异性的前提下，提高了敏感性。结果判读时采用二分类系统，即仅为阳性和阴性两种，阳性结果即可诊断为ALK阳性