糖皮质激素诱导血液系统肿瘤细胞凋亡机制的研究进展文档.docVIP

糖皮质激素诱导血液系统肿瘤细胞凋亡机制的研究进展 【摘要】：糖皮质激素(Glucocorticoid,GC) 具有促凋亡和抗增殖的作用是保守的核受体超家族中的一员，属于核转录因子GR由约800个氨基酸构成的多肽组成 根据糖皮质激素受体在细胞上的分布部位，可将GR分为细胞内受体(iGR)和膜受体(mGR)。 1 糖皮质激素细胞内受体（iGR）：人的iGR有四种亚型：GR-、GR-、GR-和GR-。其中，GR-是80年代中期克隆的第一个类固醇激素受体，是一个配体依赖的转录因子，也是胞质内含量最多的GR异构体(约占总GR的71％)[1]，主要由3个不同的功能域组成：N末端是非配体依赖的活化功能域-1(AF-1)，可与其他转录调节因子相互作用，与基因的转录活化密切相关；受体中部是序列高度保守的DNA结合区(DNA binding domain,DBD)，包含两个锌指结构(zinc fingers)，在受体二聚体的形成中起关键作用；C末端是配体结合区(1igand binding domain, LBD)，包含配体依赖的活化功能域-2(AF-2)和核定位信号，该区也是热休克蛋白结合处，参与受体的核转位以及与转录因子AP-1和NF-κB等的相互作用[2]。而GR位于胞核，不能结合GC，也没有转录激活作用，多项研究[3]表明GR能以浓度依赖的方式抑制GR-的效应，且在炎症反应中诱发糖皮质激素抵抗，其作用机制可能是竞争性结合GRE靶点，由此推测GR可能是GC作用的一个内源性抑制剂。 糖皮质激素膜受体（mGR）：mGR是存在于多种细胞膜上的糖皮质激素另一种形式的受体，在糖皮质激素的快速效应及诱导某些细胞凋亡等过程中发挥重要作用。糖皮质激素除了有经典的基因组效应外，还可能通过非基因组效应产生作用，非基因组效应包括经典非基因组效应和非经典非基因组效应，经典非基因组效应可能与其相应细胞膜受体mGR结合后，通过第二信使（Ca2+、IP3、cAMP、PKC等）介导的信号转导通路，促发一系列与基因调节相关或不相关的胞内效应。而非经典非基因组效应可能主要通过与细胞膜的直接物理化学反应介导。 二、糖皮质激素诱导血液系统肿瘤细胞凋亡机制 1 起始阶段：GR介导的基因调节 在激素不存在的情况下，GR-可以与HSP90、HSP70、HSP40、低相对分子质量蛋白P23及亲免素(immunophilin)等胞浆蛋白结合，形成非活性复合体存在于胞质中，这个复合体基本上处于解离以及ATP和HSP-70依赖的重新组合这种固定循环中，这种循环有利于GR蛋白保持在非激活状态，直到配体激活为止。GR-与配体结合后，引起HSP等分子伴侣的解离，暴露出的核定位信号使得活化的GR-迅速转位到核内，然后通过同源二聚化形成同源二聚体，进入细胞核特异性结合靶基因启动子/增强子区域的糖皮质激素反应元件(glucocorticoid response elements，GRE)，GRE的共享序列是一段大小为15个碱基的核苷酸序列：AGAACAnnnTGTTCT(n为任意碱基)，结构上具有不完全回文特征[4],GR-GC复合物同GRE作用时，GR二聚体中的两个DNA结合区分别与GRE回文结构中的半位点（half site）结合，即受体二聚体通过与GRE回文结构的非特异性结合达到与DNA相互作用的目的，这种结合导致多种辅激活因子募集到GR-DNA 复合物上，发挥相互协同作用从而促进靶基因转录[5]。GR-也可与其他转录因子(如AP-l、NF-B) 发生蛋白-蛋白相互作用，直接或间接调节凋亡相关基因的转录，改变细胞本身的生存和凋亡动态平衡，最终导致细胞凋亡[6]。但GR在肿瘤细胞内的活化可能有异于上述途径,Catts等证实，将野生型儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞暴露于地塞米松或细胞毒制剂中，可导致GR从胞质向核内移位。因而可以推测在ALL细胞中可能有不依赖配体的GR活化。 2 决定阶段:生存前和凋亡前因子的抗平衡反应 2.1前凋亡蛋白Bim表达升高诱导肿瘤细胞凋亡 前凋亡蛋白Bim最初是通过筛选小鼠的噬菌体cDNA表达文库获得的一种与Bcl-2相互作用的蛋白,在多种正常细胞包括造血细胞、上皮细胞、神经细胞以及生殖细胞中均有表达,是Bcl-2家族促生存成员的死亡配体，主要通过线粒体途径激活Bax／Bak诱导细胞凋亡[7]。目前已发现Bim存在11种异构体(BimEL、BimL、Bims、Bim7、Bim、Bim、Bim、Bim、Bim、Bim、BimAD)，其中BH3结构域决定了Bim分子的促凋亡活性，是其与同源的Bcl-2蛋白相互作用的结构基础。 血液系统肿瘤细胞中，Borensztajn等[8]证明了凝血因子Xa通过BH3结构蛋白Bim的上调诱导肿瘤细