实验 啤酒中α-氨基酸的测定.docVIP

实验 啤酒中α-氨基酸的测定 一、实验目的 学习α–氨基氮含量的测定方法，控制麦汁或啤酒质量。 二、实验原理 α–氨基氮为α–氨基酸分子上的氨基氮。水合茚三酮是一种氧化剂，可使氨基酸脱羧氧化，而本身被还原成还原型水合茚三酮。还原型水合茚三酮再与末还原的水合茚三酮及氨反应，生成蓝紫色缩合物，颜色深浅与游离α–氨基氮含量成正比，可在570nm下比色测定。 三、实验器材与试剂 分光光度计，电炉等。 (1)显色剂：称取10g Na2HPO4·12H2O ，6g KH2PO4 ，0.5g水合茚三酮，0.3g果糖，用水溶解并定容至100mL（pH 6.6~6.8），棕色瓶低温保存，可用两周。 (2)碘酸钾稀释液：溶0.2g碘酸钾于60mL水中，加40mL 95％乙醇。 (3)标准甘氨酸贮备溶液：准确称取0.1072g甘氨酸，用水溶解并定容至100 mL，0℃保存。用时100倍稀释。 四、实验步骤 (1)样品稀释：适当稀释样品至含1~3μgα–氨基氮/mL（麦汁一般稀释100倍，啤酒50倍，啤酒应先除气）。 (2)测定：取9支10mL比色管，其中3支吸入2mL甘氨酸标准溶液，另3支各吸入2mL试样稀释液，剩下3支吸入2mL蒸馏水。然后各加显色剂1 mL，盖玻塞，摇匀，在沸水浴中加热l 6分钟。取出，在20℃冷水中冷却20分钟，分别加5mL碘酸钾稀释液，摇匀。在30