双向电泳技术在作物雄性不育研究中的运用.docVIP

双向电泳技术在作物雄性不育研究中的运用 　　近年来，随着蛋白质组概念的提出[1]，蛋白质双向电泳技术越来越受到大家的关注， 该技术尤其是在作物雄性不育研究方面应用较多。 蛋白质组学的关键技术是双向凝胶电泳-质谱分析技术，该技术通过双向电泳对蛋白质进行分离， 实现对蛋白的定量研究， 后期与质谱鉴定相结合， 实现蛋白的定性分析，最后还可利用数据库对蛋白进行具体的鉴定，确定蛋白的种类、功能等[2-3]。 因此，结合双向电泳技术，从蛋白质组水平研究作物雄性不育机理， 寻找与育性相关的蛋白质，进而找到相应的不育基因，对研究作物雄性不育具有重要的理论和实践意义。 　　1 蛋白质组学研究方法 　　蛋白质组学研究的常规方法是提取全蛋白，经双向电泳分离形成一个蛋白质组的二维图谱， 通过计算机图像分析得到各蛋白质的等电点、分子量、表达量等，再用质谱分析进行蛋白质鉴定，建立“正常生理条件下”蛋白质图谱和数据库。 在此基础上，可以比较分析不同条件下的蛋白质组所发生的变化，如蛋白质表达量的变化、翻译后的加工修饰、蛋白质在亚细胞水平上定位的改变等， 从而发现和鉴定出特定功能的蛋白质及其基因[2，3]。 蛋白质组研究分析通常有 3 个步骤，第一步，运用双向电泳技术分离样品中的蛋白质；第二步，应用质谱技术或 N 端测序技术鉴定双向电泳分离的蛋白质；第三步，应用生物信息学技术储存、处理比较获得的数据。 　　1.1