基因结构与表达分析的基本策略-医本.pptVIP

基因结构与表达分析的基本策略 一、DNA序列分析 （一）双脱氧末端终止法 (Sanger ,1977) (一）双脱氧链末端终止法（dideoxy chain termination） （二）DNA测序自动化原理 采用4种不同的荧光分别标记4种ddNTP终止反应产物，替代放射性同位素标记是实现DNA测序自动化的基础。 1. DNA自动测序步骤： 4种带有不同荧光染料标记的终止物ddNTPs 荧光信号采集、计算机分析与DNA自动排序。 二、核酸分子杂交 （Nucleic Acid Hybridization ） 核酸分子杂交原理 （一）Southern印迹杂交 原理：将电泳分离的待测DNA片段结合到一定的固相支持物上，然后与存在于液相中标记的核酸探针进行杂交的过程。 （二）Northern印迹杂交 (Northern blot hybridization) 指将RNA变性及电泳分离后，并转移到固相支持物上，用杂交反应来鉴定其中特定mRNA分子的含量及其大小。 用于mRNA进行定性和定量分析。 三、 基因芯片和微阵列 DNA Chip and Microarray 四、 Western免疫印迹 Western blotting原理与核酸分子