HPLC有关物质分析方法验证幻灯片.ppt

浙江京新药业股份有限公司 1、专属性 试验方法 空白溶剂 系统适用性溶液5针 中间体及样品 中间体与样品混合溶液 破坏性试验（酸、碱、氧、高温、光照等，用到不同溶剂的，溶剂也要进样对照） 系统适用性溶液1针 图谱打印： 中间体与样品混合溶液、破坏性试验中主成分与主要杂质要打印出光谱纯度和分离度数据，如short+spectum格式打印。 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印。 必要时提供3D图 1、专属性 2、灵敏度 报告数据： 3、线性与范围 报告数据： 提供标准曲线图 4、准确度 空白溶剂 系统适用性溶液5针 正常样品检测三份 50%加杂样品检测三份 100%加杂样品检测三份 150%加杂样品检测三份 系统适用性溶液1针 图谱打印： 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印，其他图谱可用short格式打印。 已知杂质相对与主成分在HPLC上的响应比值 计算方法： (1)可直接用主成分对照品及杂质对照品进行测定。 (2)也可由主成分及杂质线性方程中的斜率比求得。 报告数据： 1、回收率、 2、平均回收率、 3、RSD 供试溶液与对照溶液分别放在室温和冷藏下保存，分别在不同时间测定HPLC 对照溶液峰面积下降值不得过10% 供试品溶液中杂质，峰面积相对偏差不得过10%。 报告数据： 1、样品与对照品的总杂质峰面积及变化率。 2、样品与对照品的已知杂质峰面积及变化率。 3、样品与对照品的最大未知杂质峰面积及变化率。 典型的变动因素包括：流动相的组成流动相的pH值流动相的流速不同厂牌的同类型色谱柱不同批号的同类型色谱柱柱温波长样品溶剂的组成及pH等，其它操作条件同常规检验 耐用性试验方法1 空白溶剂 系统适用性溶液5针 正常样品检测三份 50%加杂样品检测三份 100%加杂样品检测三份 150%加杂样品检测三份 系统适用性溶液1针 图谱打印： 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印，其他图谱可用short格式打印。 耐用性试验方法2（被测物质有较高的含量） 空白溶剂 系统适用性溶液5针 正常样品检测六份 系统适用性溶液1针 图谱打印： 系统适用必至少有一针用extend performance格式打印，其他图谱可用short格式打印。 数据报告： 求平均值与RSD，RSD小于10%。 与重复性一起共计12个数据，计算平均值与RSD，RSD小于10% 汇总一下 后注： 每次分析方法验证试验系统适用性必须符合要求。必须在系统稳定的状态下进行（要有数据表明系统是稳定的）。 验证的图谱要按要求打印。 有些验证需要具体情况具体分析。 8、耐用性 8、耐用性 NMT 15.0 0.03 三针标准液的RSD值. 4 NMT 2.0 0.95 标准品图中的拖尾因子 3 NLT 5000 23324 标准品图中的理论板数 2 NLT 2.0 3.32 分离度 1 限度 测得值 系统适用性参数 序号 系统适用性要求 要说明各峰的色谱参数，以extend performance打印 专属性试验 说明各已知物质的分离度与峰纯度 最低检测限 要说明信噪比参数，以performance+noise打印 强力试验 以DAD检测器试验，要说明分离度、理论板数等要符合全要求，要有主峰和各已知杂峰的峰纯度数据 定量限 要说明信噪比参数，以performance+noise打印 线性与范围 要说明线性方程的斜率、截距及相关系数，用Calibration处理后打印出线性图 重复性试验 要说明各试验数据的平均值与RSD 中间精密性试验 要说明各试验数据的平均值与RSD 准确性试验 要说明各试验数据的回收率与RSD 耐用性试验 要说明分离度、理论板数等要符合全要求， 说明各次数据与正常测定数据的RSD，或要说明各试验数据的回收率与RSD。 溶液稳定性试验 说明供试溶液与对照溶液在常温与冷藏下不同时间的主峰的峰面积与0时时的相对偏差。（常温与冷藏），计算与0小时的峰面积或含量的相对偏差。 图谱的要求。 每次试验：空白溶剂一至三针 系统适用性6针，RSD≤2% * 化学药物有关物质 HPLC分析方法验证 一、目的 了解与规范有关物质方法学验证。 二、验证内容 1、专属性 2、检测限、定量限、 3、线性范围 4、响应因子 5、精密度