多聚酶链式反应扩增DNA片段 高二年级生物技术方案.ppt
循环次数 DNA数量 1 2 3 20 30 3、30次循环后靶序列扩增的数量 循环次数 DNA数量 1 2 2 4 3 8 20 1,048,576 30 1,073,741,824 3、30次循环后靶序列扩增的数量 4、循环特点: 4、循环特点: ①上一次循环的产物为下一循环的模板 ②结果单链中有最初母链的只两条(无引物存在) ③其它子代DNA分子都为双引物分子 ④处于两引物之间的DNA序列呈指数增长:2N 二、实验步骤 ①准备好PCR反应体系的配方 二、实验步骤 ?② RNA引物的合成 以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的RNA引物 ?② RNA引物的合成 ?③ DNA的生成 以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的RNA引物 ?② RNA引物的合成 以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的RNA引物 ?③ DNA的生成 以DNA单链为模板,在DNA聚合酶的作用下,在RNA引物的末端由5′端→3′端合成DNA。 DNA合成的方向 子链由5′ 端向 3′端延伸 思考:DNA复制的前提是什么? 体外扩增DNA 如何打开双链? DNA复制的前提是______________; 用_________________方法 思考:DNA复制的前提是什么? 体外扩增DNA 如何打开双链? DNA复制的前提是______________
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