病原学检查 诊断学课件教学 讲义.pptVIP

第九章;病原体检查的目的:;病原体检测成败;做好病原体检查的三个基本环节：;第一节 标本采集、运送和 检测方法;何为双侧双瓶？; ?粪便： 清洁容器，粘液脓血便；直肠拭子；根据细菌 种类不同选用合适运送基 ?呼吸道标本：鼻咽拭子以无菌棉拭沾取生理盐 水后挤干再取样；痰则为漱口后 由深部咳出的新鲜痰液；无菌试 管或痰杯送检。 ?泌尿生殖道标本：无菌手续采样， 试管送检；;?创伤、组织和脓液标本： 创面：清除污物，常规消毒皮肤； 开放性脓肿：无菌棉拭于病灶深部取样 封闭性脓肿：注射器抽取；疑厌氧菌感染 则应排除管内空气送检 ?血清：无菌送检;标本的实验室质量评估标准----;病原体检查方法;二、检查方法：;（2）病原体分离培养和鉴定： 分离培养是微生物学检验中确诊的关键步骤。对不能人工培养病原体可通过易感动物接种、细胞培养等方法进行鉴定。 ;二、检查方法：;小 结;第二节 病原体耐药性 检查;细菌耐药性是如何形成的;（一）细菌的耐药机制;细菌耐药的几种生化机制： ?细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统 ?产生灭活抗生素的水解酶和钝化酶； （质粒介导的ESBLs,AmpC,碳青霉烯酶，氨基糖苷类钝化酶等） ?细菌抗生素作用靶位的改变； ?细菌外排系统过度表达（增加、增强）； ?细菌生物膜的形成； ?细菌缺乏自溶酶……..;细菌产生耐药机制的特点;例：绿脓杆菌的耐药机制;多重耐药菌的定义;药敏实验方法： ?K-B纸片扩散法：（定性） 结果判读：敏感—S；中敏—I；耐药—R； ?稀释法：（定量） 结果判读：MIC—8?g/ml; MBC—16?g/ml； ? E试验：是将扩散法和稀释法结合应用的一种操作简便的方法，但纸片价格昂贵。;药敏实验的意义： 1.可对抗菌药物的临床效果进行预测，查出耐药，减少治疗错误，便于医生选择个体化治疗方案，从而节省费用； 2.可用于耐药监测及流行病学调查，为医院感染控制部门提供防治依据； 3.可为新药的研究和评估提供有价值的信息； 4.利用药敏监测结果控制药物应用，延长新药使用寿命。;耐药菌监测试验（目前实验室可常规开展） 1、MRS的筛选测定 2、HLAR的筛选测定 3、PRSP的筛选测定 4、?内酰胺酶的测定 5、ESBLs的检测 病原体耐药基因的检测;临床上重要的耐药菌株;革兰阴性菌： ?产 ?内酰胺酶菌株； ?产 ESBLs（超广谱?内酰胺酶）菌株； （主要是质粒介导产ESBLs的大肠杆菌、肺炎克雷伯菌）； ?多种耐药机制共存的细菌：绿脓、不动杆菌，嗜麦芽窄食单胞菌等； ?产 SSBLs（超级广谱?内酰胺酶）菌株； （同时产ESBL和质粒介导的AmpC酶） ?产碳青霉烯酶的细菌：CR-PA,CR-KP,CR-E.coli ;（二）耐药病原体;分离细菌以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和凝固酶阴性葡萄球菌最常见;第三节 临床感染常见 病原体检查;一、流行病学特点： 1、新传染病陆续被发现、老传染病死灰复燃； 2、多重耐药菌出现； 3、院内感染及条件致病菌感染的增加。;二、临床类型： 对人类致病的病原微生物500种，常见 的病原体有： 细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋 体和寄生虫。 ?细菌感染仍然是发病率较高的感染性疾病 ?病毒性感染是人群发病率最高的感染类型;（一）细菌检测 1.涂片镜检： 优点：快速直接，成本低，适用于大多数临 床标本。 缺点：不能确切鉴别细菌的种属；不能提 供药敏结果；不能定量； 应用：急诊标本；临床一级报告.;2.培养鉴定+药敏 优点：可定量计数，鉴定种属，提供药敏 结果； 不足：时间相对较长。 大多数细菌：24~48小时 ； L型菌、厌氧菌：5~7天； 结核杆菌：7~60天。 应用：临床常用 ;（二）真菌检测（浅部真菌和深部真菌） 1.涂片镜检； 2.培养鉴定；（时间较长：4周） 3.血清学诊断。 （三）病毒检测 1.细胞培养； 2.镜检：（光学显微镜、电镜） ;（五）其他病原体的检测 1.支原体检测（缺乏细胞壁，革兰染色不易着色，直接镜检无临床意义） 检查方法： ?培养法 固体（快，24~48h）