【生物】人教版选修1讲义：专题5　DNA和蛋白质技术 专题整合提升 Word版含答案.docxVIP

知识系统构建DNA和蛋白质技术必背要语1.DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用酒精将DNA和蛋白质分开。2.DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。3.PCR原理：DNA热变性原理。PCR每次循环都包括变性、复性和延伸三步。4.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。5.利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。6.在电泳中，待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。7.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。8.蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理与粗分离、纯化和纯度鉴定。9.在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。规律方法整合整合一　DNA的粗提取与鉴定中的“234”加蒸馏水2次①加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水破裂②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中，使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L，DNA析出用纱布过滤3次①过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液②过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液③滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)用NaCl溶液4次①加2 mol/L的NaCl溶液，溶解提取细胞核物质②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出③用2 mol/L的NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物④用2 mol/L的NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA例1　将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是(　)A.P、Q、R B.p、q、r C.P、q、R D.p、Q、r答案　C解析　DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，过滤后DNA在黏稠物p中，可以丢弃P；DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解过滤后，DNA在滤液中，可以丢弃q；DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液，所以过滤后DNA在黏稠物r中，可以丢弃R。整合二　去除DNA滤液中杂质的三种方案项目原理方法方案一DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L，过滤除去不溶的杂质；再调节NaCl溶液物质的量浓度为0.14 mol/L，析出DNA，过滤除去溶液中的杂质，再用物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA方案二DNA对酶的耐受性直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质方案三DNA对高温的耐受性将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使蛋白质沉淀而DNA分子还未变性，可将DNA与蛋白质分离例2　如图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答问题。―→―→―→―→一 二 三 四―→―→―→五 六 七 八(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入 并搅拌，可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二：过滤后收集含有DNA的 。(3)步骤三、四的操作原理是 。步骤四通过向溶液中加入 调节NaCl溶液物质的量浓度至 mol/L, DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七：向步骤六过滤后的 中，加入等体积的冷却的 ，静置2～3 min，溶液中会出现 色丝状物，这就是粗提取的DNA。(5)步骤八：DNA遇 试剂，沸水浴5 min，冷却后，溶液呈 色。答案　(1)蒸馏水　(2)滤液　(3)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质　蒸馏水　0.14　(4)滤液　体积分数为95%的酒精　白　(5)二苯胺　蓝解析　第一步加入蒸馏水的目的是使红细胞涨破，释放出核物质；第二步收集含有核物质的滤液；由于DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，所以通过控制NaCl溶液的浓度可以分别溶解DNA和析出DNA，并且对 DNA进行提纯；第四步加入蒸馏水的目的是逐渐稀释NaCl溶液，使其物质的量浓度为0.14 mol/L，这时DNA在NaCl溶液中溶解度最低，可以析出DNA。DNA不溶于冷酒精，某些蛋白质可以溶于冷酒精，这样可以进一步提纯 DNA。鉴定DNA的方法是用二苯胺试剂，在沸水浴加热条件下，如果变蓝色，证明存在DNA。整合三　DNA的粗提取、PCR技术、蛋白质分离之间的比较项目DNA的粗提取PCR技术蛋白质分离实验原理DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精利