艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术教材课程.ppt

艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术;艾滋病 抗体检测及 样品处理;艾滋病抗体检测及样品处理;二、 筛查程序 初筛和复检流程 （图1） ;三、筛查试验结果的报告 （建议用修改后附表3）（例） HIV抗体筛查试验用附表1进行报告，阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。 ;四、 HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程 1、适用范围 HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。 ;2、检测程序;第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。 ;;质量控制;2、室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。 ;二、 统计室内质控的主要表示方法—建立质控图 最常用的质控图是Levey-Jennings质控图，下面以ELISA方法检测HIV抗体为例，描述建立质控图步骤： ;2、绘制质控图 （a）在常规条件下，对同一批血清连续测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值，求均数（ ）和标准差（s）, 超出2s或3s的数据不应删除。 （b）将均值（ ）和标准差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次试验作横座标（x轴），绘制质控图。 ;（c）从第21次起，将每次质控血清的检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。 ;3、质控规则及其使用 质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，目前有许多质控规则，常用的是12S和13S规则。 （a）告警（12S）：当外部质控品的S/CO值超出 +2s范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。 ;（b）失控（13S）：当外部质控品的S/CO值超出 +3s范围时，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部质控品 稳定性下降所致。 （c）漂移：连续几次（3～5次）外部质控品的S/CO值都落在均值的一侧则称为漂移，提示实验条件发生了较大的变化。 （d）趋势：连续几次（5～7次）外部质控品的S/CO值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由参数的缓慢改变引起。 ;艾滋病实验室生物安全;二、HIV相关检测的生物安全级别 HIV抗体检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。 ;三、生物安全保证措施 1、建立安全制度 艾滋病检测实验室应建立下列安全制度 (1) 实验室的安全工作制度或安全标准操作程序（S-SOP）。 (2) 意外事故处理预案，主要是生物安全意外事故。 (3) 信息安全及保密制度：（例） ;2、培训和管理 3、个人保健和防护 4、安全操作 5、实验室的清洁和消毒 工作完毕应对工作台面消毒，推荐用0.1～0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作过程中如有样品、检测试剂外溅，应及时消毒。;如有大量高浓度的传染性液体溅出，在清洁之前应先用1%的次氯酸钠溶液浸泡，然后戴上手套擦净。离心样品时要使用密闭的罐和密封头，防止离心时液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。 ;四、污染物处理 1、艾滋病实验室产生的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行处理或废弃。 ;2、艾滋病检测实验室常用的消毒方法 （1 ） 物理消毒方法 a 高压蒸汽消毒，121℃，保持15～20min; b 干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2～3h。 （2） 化学消毒方法 含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000～5000mg/L）、75%乙醇、2%戊二醛 ;（3）艾滋病检测实验室物品常用的消毒方法 a、废弃物缸：5000mg/L 次氯酸钠。 b、生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。 c、溢出物：5000mg/L次氯酸钠。 d、污染的台面和器具：2000mg/L 次氯酸钠,也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。 ;艾滋病检测实验室质量管理;二、质量保证 1、人员培训 检测技术人员需经过上