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第十六章 植物的遗传转化  二 转基因程序及主要方法1 一般程序 二 转基因程序及主要方法2 基因介导方法和用到的离体培养物 根癌农杆菌方法 病毒表达系统介导 Agrobacterium tumefaciens * * 一 引言 二 转基因程序及主要方法 三根癌农杆菌转化方法 四 转基因植物的应用和现状 五 课后问题 一 引言 1 概念： 植物遗传转化（转基因）就是将外源基因导入植物细胞，经过 组织培养将细胞培养成植株，并且导入 的基因在植物体内能 够稳定表达和遗传。这样的植物称为转基因植物。 2 植物遗传转化与植物组织培养技术的关系 A 植物离体培养是植物遗传转化的最基本的操作平台： a 离体 b 微型 c 可控 B 可以用做遗传转化平台或受体的组织培养技术有： a悬浮细胞培养体系 b 原生质体培养—植株再生体系 c 愈伤组织—植株再生培养体系（包括体细胞胚） d 单倍体—植株再生培养体系 e 外植体（根、茎、叶）—直接再生体系（快繁） 植物组织培养的一般概念和分类 2 几种培养类型及相关关系图解 　外植体（茎、叶、根、胚、花药等等） 　　丛生芽、茎（茎及茎尖）　　　　　　　　植物 快繁、脱毒 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　遗传转化 　　愈伤组织　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　无性系筛选 　　　　　　　　原生质体培养　　　　体细胞融合 悬浮细胞培养　　　　　　　　　　　次生代谢产物生产 　 　　单倍体 （花药培养 ） 　　　　　　　　　单倍体育种 　　三倍体（胚乳培养）　　　　　　　　　　　多倍体育种　 　　 胚培养　　　　　　　　　　　　　　　　　胚挽救、远源杂交 二 转基因程序及主要方法2 基因介导方法和用到的离体培养物 除上述方法外近年来报道新方法还有： 激光微束介导法 花粉管导入法 根癌农杆菌-真空介导法 离子束介导法 转座子系统介导法 三根癌农杆菌转化方法 1 根癌农杆菌介绍： 根癌农杆菌是一种能够感染植物特别是双子叶植物 的细菌；根癌农杆菌含有一个以上的质粒（Ti，核外遗传单位）；根癌农杆 菌感染植物后，质粒可以进入植物细胞内，进行复制，并有把DNA整合到 宿主染色体上的能力（表现为瘤状突起，冠瘿瘤）。 2 根癌农杆菌介导方法思路： 外源目的基因、真核生物启动子、选择基因、报告基因片段 体外连接到质粒中 质粒转化进入到根癌农杆菌 感染植物外植体 * * *