农杆菌介导的菊花转基因研究.pdfVIP

第 23卷 第 5期 中 南 林 学 院 学 报 V0I．23 No．5 2003年 10月 jouRNALoFCENTRALSOUTH FoRESTRY UNIVERSITY Oct．2003 [文章缩号]1000--2502(2003)05--0001--04 农杆菌介导的菊花转基因研究 高亦珂 ，张启翔。，刘容薇。，李 毅。 (1．北京林业大学园林学 院，北京 。100083 2．深圳农科中心花卉技术应用技术研究所 ，广东 深圳 。518000； 3．北京大学生命科学 院。北京 100087) [摘 要] 为了在地被菊中建立外源基因的转化体系和获得转基因地被菊美矮黄植株，利用农杆菌介导法在地被菊美矮黄中建立 了转化体系 ，并获得 了转入外源基 因CHS的转基因植株 ，PCR—Southern杂交和Southern杂交都 已经证实 了外源基 因的转入。研究 中 发现潮霉素对转化植株分化具有一定的抑制作用 ． [关■词] 生钧技术，菊花，农杆菌，转基因 [中圈分类号] $682．1+1，Q813．2 [文献标识码] A TransformationofChrysanthemum (Dendranthemagradiflora) UsingAgrobacterium M ediation GAO Yi．ke，ZHANG Qi—xiang。，LIU Rong—wei。，LlYi。 (1。BeijingForestryUniversity，Beijing100083，China；2．Instituteofapplyingtechnique·CenterofAgricultural Sciences。Shenzhen518000，China；3．CollegeofLifeSciences，PekingUniversity，Beijing，100871，China) AbstractlByusing Agrobaterium mediation，the transformation system wasestablishde and theCHS genes帆 reshiftde to chrysanthemum plants．TheshiftofCHSgeneswasconfirmedbyPCR—So uthernand So uthernhybridization。PlantregenerationU S provedtoberestrainde byhygromycinresistance． Keywordslhorticulture；biotechnology；chrysanthemum (Dendranthemagradiflora)，Agrobaaerl-m ，tranagenosis 菊花 Dendranthemagradiflora起源于我国，是世界上著名 的切花 ，也是产量最高的盆栽花卉 ，具有很高的 观赏价值．在观赏植物中，到 目前为止，农杆菌介导法仍然是外源基因转化的最有效的途径[1]．在菊花中转基因 研究 目前也处于起步阶段 ，主要进行 了建立转化体系、提高转化效率等初步研究 。 ．本研究中，利用农杆菌导 入外源基 因CHS(查而酮合酶 chalconesynthase，)，并获得 了8个转化株系． 1 材料和方法 1．1 材 料 (1)植物材料 实验所用菊花无菌苗美矮黄来 自北京林业大学 良种繁育 中心． (2)菌株及共培养 大肠杆菌转化 的受体菌株为北京大学生命科学 中心李毅实验室保存 的E．Coli DH5a．农杆菌为 A．tumefaciensLBA440．克隆质粒载体为 PBLuescriptSKC+／一和购 自Promega公司的 [收稿 日期]2003．05·21 [作者1畸介]高亦珂(1966一)，女，辽宁海城人，副教授，IS=t=，主要从事分子