卵巢上皮性肿瘤中AQP-1的表达及临床意义.docVIP

卵巢上皮性肿瘤中AQP-1的表达及临床意义 【摘要】目的研究卵巢癌中水通道蛋白1（AQP1）的表达及临床意义。方法卵巢上皮性癌组38例；卵巢交界性上皮性肿瘤组12例；卵巢良性上皮性肿瘤组9例；正常卵巢组织7例为对照(正常组)。免疫组织化学(SP)进行染色。将AQP1的表达与卵巢上皮性肿瘤的关系作出研究。结果1）在细胞的细胞浆内及血管内皮细胞中表达阳性。卵巢上皮性癌中78.95%及卵巢交界性肿瘤中66.67%，显著高于卵巢良性肿瘤33.33%和正常卵巢组织28.57%的表达率，差异有显著性（P0.05）；2）卵巢癌有腹水者其AQP1表达率水平明显高于无腹水量者，差异有显著性(P0.05)；与病理分型及分化程度无关；3）恶性肿瘤，交界性肿瘤，良性肿瘤及正常卵巢MVD有明显差异；证明MVD值与AQP1表达上调有关。结论AQP1在卵巢癌的病理机制和卵巢癌腹水的发生到增多可能起到作用。 【关键词】 卵巢上皮性肿瘤水通道蛋白1腹水 卵巢恶性肿瘤是女性生殖器常见的三大恶性肿瘤之一，占女性生殖器恶性肿瘤的20%，卵巢上皮性癌占卵巢恶性肿瘤的90％。水通道蛋白1(aquaporin,AQP1)具有极强的水通透性［1］。2002～2006年间在哈医大第一附属医院，及齐医学院第三附属医院妇产科，住院手术的66例卵巢上皮性肿瘤组织标本，与AQP1蛋白的表达关系研究结果如下。 1 实验材料和方法 1.1 组织标本制备 收集2002～2006年间在哈医大第一附属医院及齐医学院第三附属医院妇产科住院手术的66例患者的石蜡组织标本。分为4组:卵巢上皮性癌组38例；卵巢交界性上皮性肿瘤组12例；卵巢良性上皮性肿瘤组9例；正常卵巢组织7例为对照(正常组)。卵巢上性癌手术病理分期:采用国际妇产科联盟2000年修订的手术病理分期标准，其中I期7例，II期9例，III期13例，N期9例;其中15例伴有淋巴结转移;病理类型:浆液性22例，粘液性11例，内膜样5例，病理分级:G17例，G217例，G314例；腹水量，无腹水7例，有腹水（100ml）31例。患者腹水量为开腹后立即吸取，且所有患者术前未进行任何治疗，无并发症。患者年龄34～79岁，平均年龄56岁。上述标本，连续切片4mu;m厚，HE染色，病理证实。 1.2 方法 免疫组化 免疫组织化学(SP)法进行染色。以PBS替代一抗作为阴性对照，以已知AQP1强烈表达的乳腺癌标本做阳性对照。 1.2.1 具体方法 1）载玻片准备；2）切片脱蜡；3）抗原修复；4）阻断内源性过氧化物酶的活性；5）滴加一抗，兔抗人AQP1多克隆抗体；6）加生物素标记的第二抗体；7）滴加辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素溶液；8）DAB溶液显色5～10分钟；9）中性树脂胶封片；10）苏木精复染。 1.2.2 阳性结果判定 在肿瘤细胞的细胞质或细胞膜内出现棕黄色颗粒者作为AQP1阳性细胞，无着色为阴性细胞。 1.3 统计学分析 1.3.1 AQP1结果的判定 以阳性细胞百分率进行评估。随机取4个视野,每个视野计数100个肿瘤细胞,计数400个肿瘤细胞中染色阳性细胞数,阳性细胞数10%为表达阳性；10%为表达阴性。表达强度以阳性细胞的百分率来划分:无阳性着色或阳性细胞10%细胞为阴性(-),30%为弱阳性(+),30%～60%为中阳性(++),60%为强阳性(+++)。 1.3.2 肿瘤微血管密度（MVD）计数 微血管密度的判定：染成棕色的单个血管内皮细胞或细胞簇，大于8个内皮细胞形成的管腔不记数。寻找5个微血管高密度区，然后在200～400倍镜下记数计算微血管密度，以5个区域的均值为该肿瘤的MVD值，微血管数取最高值。 采用SPSS 11.0统计软件包进行统计分析。采用fisher确切概率法，chi;2检验和t检验对相应资料进行分析,取a=0.05为检验水准。 2 结果 2.1 AQP1在卵巢上皮性肿瘤中的表达 AQP1在卵巢上皮癌中表达阳性率为78.95%，交界性上皮肿瘤中为66.67%，良性肿瘤为33.33%,正常卵巢为28.57%。卵巢上皮性癌及交界性肿瘤表达率，显著高于良性肿瘤和正常组织，差异有显著性（P0.05）；而良性肿瘤与正常组织之间，恶性与交界性之间差异无显著性（P0.05）。 2.2 AQP1在不同临床病理特征卵巢癌中的表达 有腹水者明显高于无腹水量者，差异有显著性(P0.05)；与病理分型分化程度，有无淋巴转移无关差异无显著性(P0.05)。 2.3 AQP1与肿瘤微血管密度（MVD）的关系 CD34标记显示：AQP1强阳性表达的组织MVD明显大于弱阳性表达的组织(P0.01)及阴性组织(P0.05)，中阳性明显低于强阳性(P0.01)；有腹水的明显多于无腹水的(P0.05)；证明MVD值与AQP1表达上调有关。 3 讨论