妇炎栓的质量标准研究.docVIP

妇炎栓的质量标准研究 作者： 单位：甘肃省中医院（兰州） 【摘要】 目的：建立妇炎栓(夏枯草，金银花等)的质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中夏枯草、金银花进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定处方中丹参的丹酚酸B含量。结果：在薄层色谱鉴别中能检出夏枯草、金银花；丹酚酸B在0.102～1.33mu;g/ml范围内有良好的线性关系，r=0.9999，平均回收率101.0%，RSD=2.5%。结论：该法简便、准确、方法可靠、重现性好，可作为控制妇炎栓质量的方法。 【关键词】 妇炎栓 质量控制 TLC HPLC 仪器与试剂 实验仪器：Lc-2010高相液相色谱仪；Class-VP 色谱工作站；色谱柱：国产C18柱(5mu;m，4.6times;250mm)；流动相：甲醇-水(20:80)；10A-VP型高相液相色谱仪；检测波长：286nm 验药品与试剂：夏枯草、金银花、丹酚酸B对照品，妇炎栓3批；甲醇、己晴均为色谱纯，其他试剂为分析纯；水为重蒸馏水。 薄层鉴别 夏枯草薄层鉴别：取本品4枚，切碎，加甲醇50ml，加热回流1小时，放冷滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，弃去石油醚液，残渣加1ml甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取夏枯草对照药材1g，加水回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为对照品溶液。按照处方工艺，依次取处方量药材，缺夏枯草药材制成栓剂，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10mu;l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(20:5:8:0.5)为展开剂，展开，凉干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点，阴性对照液无干扰。 　　金银花薄层鉴别：取本品4枚，切碎，加水50ml，加热熔化调pH为10，放冷滤过，滤液用20ml乙酸乙酯萃取，弃取乙酸乙酯液，水层调pH为4，用20ml乙酸乙酯萃取，滤液蒸干，加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.2g，加甲醇回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解，作为对照品溶液。按照处方工艺，依次取处方量药材，缺金银花药材制成栓剂，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10mu;l，分别点于同一硅胶H薄层板上，氯仿-丙酮-甲酸(6:4:2)为展开剂，展开，取出，凉干，置日光下一段时间及紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点，阴性对照液无干扰。 含量测定 方法的建立：本制剂中君药为丹参，收载于2005年版《中华人民共和国药典》一部，丹参主含醇溶性成分丹参酮ⅡA和水溶性成分丹酚酸B，根据处方工艺，故拟采用高效液相色谱法对处方中丹参的丹酚酸B进行含量测定，做为附炎栓的定量指标。 对照品溶液的制备：精密称取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含0.051mg的溶液。 供试品溶液的制备：取本品10粒，精密称定，剪碎，取约6g，置圆低烧瓶中，精密加入甲醇(75%)50ml，加热回流2小时，放冷，用甲醇(75%)补足减失重量，摇匀，放冷滤过，取续滤液即得。 阴性对照液的制备：按上述供试品溶液制备方法制成阴性对照液。 色谱条件：Lc-2010高效液相色谱仪；Class-vp色谱工作站；色谱柱：国产C18柱(5mu;m，4.6times;250mm)；流动相：甲醇-水(20:80)；10A-VP型高效液相色谱仪；检测波长：286nm。 结果：按照以上条件进行实验，理论塔板数N=2350，分离度R=1.6。 干扰试验：取供试品溶液及阴性对照品溶液各10mu;l，按上述色谱条件进样测定。结果显示阴性对照溶液在丹酚酸B保留时间处无色谱峰，供试品溶液中丹酚酸B与其他成分分离好，表明在此条件下，其他药材成分对测定无干扰。 线性关系考察：精密称取丹酚酸B对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.051mg的溶液，分别精密吸取上述溶液2、4、6、8、10mu;l，注入液相色谱仪，测定，以进样浓度对蜂面积积分值计算，线性范围：0.102～1.33mu;g。回归方程C=6.51times;10-7－9.83times;10-3，r=0.9999。 精密度试验：精密吸取对照品溶液10mu;l，连续进样5次，测定峰面积积分值，RSD=0.7% 稳定性试验：标准品溶液自配好后，每隔一定时间测定1次蜂面积分值，丹酚酸B在配制后24小时内，积分值基本不变。RSD=0.9%。 重现性试验：取同一批号样品，按含量测定方法平行测定5