癌基因的发现.PPT

癌基因的研究现状 山西医科大学第一医院 癌基因的发现 已知道在肿瘤发生中，作为环境因素的病毒、化学致癌物和射线，它们作用于机体内的靶分子都是DNA，研究肿瘤病毒如何使宿主细胞转化和研究肿瘤DNA能否使培养的经两条实验途径中，殊途同归，发现癌基因，早在本世纪初，Rockefeller研究所Rous医生将鸡肉瘤组织匀浆后的无细胞滤液皮下注射于正常鸡，发现可引起肿瘤，当时对病毒还缺乏认识，直到五十年代才重新发现原来致瘤的因素是病毒，并以Rous医生的名字命名为罗氏肉瘤病毒（Rous Sarcoma Virus ,RSV）。 1975年，Bishop从RSV中分离到第一个病毒癌基因src，该基因编码分子量为60kDa的磷蛋白质，以pp60src表示。　　 癌基因的发现 1976年Stehelin实验证明正常鸡成纤维细胞基因组中存在有与病毒癌基因src的同源序列。陆续发现许多禽类和鼠类病毒部基因也有类似情况，即宿主细胞基因组中含有病毒癌基因的同源序列，称为细胞癌基因（c-oncogene,c-onc）。 癌基因的发现 v-onc与c-onc的关系如何？从二者结构的比较和逆转录病毒感染宿主后的生活史或复周期两方面加分析。 首先，结构上看c-onc是间断的，是真核基因特点，即有内含子因而基因的跨度较大。然而v-onc却是连续的，没有内含子，基因跨度较小，以v-onc和c-src为例如图1。再从逆转录病毒感染宿主细胞后的复制周期（图2）分析。 图1 c-src和v-src结构的比较 图2　逆转录病毒正常复制周期主要步骤 不难看出，v-onc原本不是病毒的基因，而是动物细胞正常基因的一个复本。当病毒在宿主细胞内复制时，由于DNA重组而将宿主细胞基因中带有v-onc的序列重组到病毒的基因组内。c-onc是v-onc原型，又称原癌基因（proto-oncogene）。 病毒癌基因对病毒本身无关紧要，却可使宿主细胞转化，引起肿瘤，而细胞癌基因对细胞的生长、分化和功能活动却是至关紧要的。正常的细胞癌基因并不致癌，只是当它们异常表达或其表达产物异常时才会导致细胞的恶性转化，迄今发现的细胞癌基因都是一些有十分重要的功能“看家基因”，而且是高度保守的，例如人与小鼠的K-ras基因产物K-Ras的氨基酸序列相差仅为1%，人与大鼠的H-ras基因产物H-Ras的氨基酸序列完全相同。 逆转录病毒属于RNA肿瘤病毒，在DNA肿瘤病毒的基因组也存在着能使宿主细胞转化的基因，例如腺病毒的E1A、E1B基因，多瘤病毒的大T、中T基因。人乳头瘤病毒的E6、E7基因，以及DV40中的大T基因。它们为病毒复制所必需，同时又有使宿主细胞转化的作用，故沿用原名，不另以癌基因命名。 癌基因的功能 使细胞癌变并不是细胞癌基因的惟一功能。在正常细胞中，原癌基因并不是完全没有活性的，原癌基因的蛋白质产物参与正常细胞的生长、分化和增殖。因此，确切地说，细胞癌基因是具有正常的生理功能，只是在一定条件下才会引起细胞癌变的一类基因。 很多癌基因在进化上是相当保守的，如c—ras基因在酵母、果蝇、小鼠和人的正常基因组均有存在，这也是癌基因具有正常功能的一个有力佐证。 研究现状 对于癌基因的研究目前尚存在争议，抱乐观态度的人认为这是肿瘤研究中的重要突破。癌基因的分离成功不仅有助于阐明癌变的机理，而且有重要的实用价值。 在理论上，它说明化学致癌物和致癌病毒引起癌的根本原因可能在于激活了细胞中内在的原癌基因。在实用意义上，由于癌基因的激活使细胞合成相应的、特异的转化蛋白，后者有可能被用于诊断。而且如果能抑制癌基因的激活或使转化蛋白失活，那么将有可能提供癌治疗的新途径。 研究现状 持保留态度的人则认为癌变是一个多阶段的过程，把它看作只需要一个癌基因的激活的结果似乎是过于简单化了。尤其是在正常细胞中癌基因也并不是完全不表达的。这一现象的发现使问题更为复杂化。迄今为止，已分离的癌基因多与致癌的RNA病毒有关，而且都是依据它们对小鼠成纤维细胞转化受体系统的致癌活性来判定的。因此还可以怀疑这种系统的局限性，可能某些癌基因用现有的手段尚无法检出。