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泽 泉 科 技 有 限 公 司 Zeal Quest Scientific Technology Co.,Ltd 上海市 中江路879 号天地软件园 28 号楼402-403 室（邮编：200333 ） 调制叶绿素荧光的基本原理 韩志国 顾 群 （泽泉科技有限公司，上海，200333） 光合作用是地球上最重要的化学反应，它利用太阳光能裂解水释放出了地球上绝大多数生命活动所 需的氧气，同时固定大气中的 CO2 合成葡萄糖为新陈代谢提供能量。目前发现整个光合作用过程约包含 60 多个步骤。叶绿素荧光、气体交换和光合放氧是光合作用研究的3 大技术。调制叶绿素荧光技术尽管 出现最晚，但由于其测量快速、可靠、灵敏、对样品无损伤等特点，使其迅速受到光合领域科研人员的 青睐，目前已成为发表文献最多的技术。 1．光反应 叶绿素荧光的理论基础来源于光合作用的光反应。在类囊体膜上分布着PS II 、Cyt b /f 、PS I 和ATPase 6 四种复合体（图1）。光反应可以合成NADPH 和ATP 供暗反应所需。 图1 光反应过程 PS II 的捕光色素吸收光能后将能量传递给反应中心叶绿素P680 ，P680 吸收光能后会放出电子生产 强氧化剂P680+ + ，P680/P680 的氧化还原电势可以引起H O 裂解放出 O 、电子和质子。电子经过Phe 、 2 2 QA 、QB 等电子递体后传到质体醌PQ 。PQ 每次只能传递2 个电子，是光合电子传递链的限速步骤，因此 PQ 被称为电子门。此后，电子继续传递经过Cyt b + 6/f 和PS I 后将NADP 还原得到还原力NADPH 。 在PS II 裂解水时会释放出质子，在PQ 处经过PQ 循环会从基质中转运质子到类囊体腔中，这样在 类囊体膜两侧就形成了一个质子梯度。类囊体腔中的质子可以经过ATPase 的质子通道回到基质中，在这 个过程中会促进基质中的ADP 转化为ATP 。 由此，经过光反应得到NADPH 和ATP ，它们进而参与Calvin 循环，固定CO2 合成葡萄糖。 Tel : 02115/16/17/18 Fax: 021 E-Mail:sales@ 泽 泉 科 技 有 限 公 司 Zeal Quest Scientific Technology Co.,Ltd 上海市 中江路879 号天地软件园 28 号楼402-403 室（邮编：200333 ） 2 ．叶绿素荧光的产生 叶绿素分子吸收光能后，会从基态跃迁到激发态。叶绿素可以吸收红光或蓝光。蓝光的能量比红光 高，因此吸收红光后色素分子只能跃迁到最低激发态，而吸收蓝光后可以跃迁到较高激发态（图2 ）。但 较高激发态很不稳定，会迅速将多余的能量以热的形式耗散掉，回到最低激发态。由此可知，无论吸收 红光还是蓝光，其光合效率是相同的，蓝光的多余能量并未用于光合作用。与基态相比，最低激发态也 不稳定，也要释放能量回到基态。此时释放的能量有3 条去路：光合作用、热耗散和叶绿素荧光（图2 ）。 由此可知，叶绿素荧光就是植物吸收 光能后重新发射出来的一种波长较长、能量较低的红光（其余大部