第七章培养细胞常规检查.pptVIP

本章重点 了解并掌握体外培养细胞常规检查的基本内容和方法。 了解体外培养细胞常用的生物学检测方法。 一、常规检查 培养液PH值（颜色变化），清亮度（是否污染）和细胞生长状态等。 1.PH值 正常值：7.2～7.4 “酚红”，呈橙红色 PH下降，酸化 变黄 PH升高，碱化，变紫红色 上述两种情况对细胞都将产生不利影响，严重时细胞脱落死亡。一般通5%CO2来维持，或是通过换液（2次/周），换法略。 2.微生物污染及排除 常见的微生物污染有细菌、霉菌、支原体、原生动物污染等。①细菌污染 眼观：培养液混浊，显微镜下可见大量细菌，常见细菌为：大肠杆菌，葡萄球菌，沙门氏杆菌等。可用琼脂培养或肉汤培养检测。排除：抗菌素联合用药，不可常用。 ②霉菌污染 眼观：易见，白色或浅黄色小点为菌落。排除：较难排除，全实验室用甲醛熏蒸。 ③支原体污染 眼观：培养液不混浊，对细胞影响不大。排除：a传代和换液可排除，b抗生素处理，如四环素、卡那霉素、泰乐菌素和麦诺霉素等，c特异性血清，d高热处理，e巨噬细胞和抗菌素联合处理。 主要是操作过程中导致，细菌、其他细胞、其他微生物交叉污染。 排除：①实验器材，不混用。②培养液公用时，细胞吸管和细胞用液管要分开。 4.化学物质污染及排除 可能涉及过的各种化学物质。