几类近红外荧光探针设计合成及其应用-design, synthesis and application of several kinds of near infrared fluorescence probes.docx

几类近红外荧光探针的设计合成及其应用中文摘要几类近红外荧光探针的设计合成及其应用中文摘要近红外荧光检测由于能避免生物体自发荧光干扰，降低对生物样品的损伤，并能 更深地穿透生物组织，成为生物检测和生物成像的首选的检测方法之一。而目前所研 究的近红外荧光探针中，大多局限于多甲基菁类化合物，而多甲基菁化合物光稳定性 存在缺陷，故开发基于新型荧光团的近红外荧光探针具有重要的理论意义及实际应用 价值。氢离子是生物体内广泛存在的一种离子，在生命活动的各个环节中，小到细胞的 生殖凋亡，离子运输，细胞内吞，酶活性，大到各个组织，系统的运作，如肌肉收缩， 神经系统的信号传递，起着至关重要的作用，并且不正常的 pH 值与一些常见疾病， 如癌症，阿尔兹海默症等息息相关；一氧化氮是生物体内必不可少的一种瞬态自由基 物质，作为信使分子，它在心血管系统，神经系统和免疫系统的一系列生理学和病理 学过程中起着重要的调节与媒介作用。不正常的一氧化氮产生与癌症，神经退行性损 伤，发炎等疾病有着密切联系。因此，用近红外荧光探针检测生物体系中的 pH 值， 一氧化氮的浓度在生物化学及临床诊断学中具有重要意义。本文基于苯并噁嗪及萘罗丹明染料设计合成了几类 pH 探针及一氧化氮探针，对 其光学性质进行了研究。结果如下：1. N-芳基取代的苯并噁嗪化合物（探针 1a-1b）被合成并研究其 pH 响应的吸收 和发射性能。其中，亚胺上氮原子被吸电子芳基取代的苯并噁嗪化合物（探针 1b） 显示了其可用于近红外 pH 荧光探针的潜力，在此基础上，N-烷基吡啶盐取代的苯并 噁嗪类水溶性近红外 pH 探针 3a-3c 被设计合成，在含 0.1% DMSO 的缓冲溶液中， 它们展现出可逆的 pH 响应，增强倍数在 8.2-40.1 倍之间，pKa 分别为 2.7，5.8，7.1； 将它们混合配制成复合探针，在 pH = 1.9-8.0 之间，该探针的荧光强度与 pH 值成线 性关系，该探针还能用于细胞质 pH 实时检测。2. 母体环上被腈基或羟基取代的苯并噁嗪类化合物（探针 6a-6b）被设计合成， 其中，化合物 6a 在含 1% DMSO 的缓冲溶液中具备 OFF-ON 型的荧光变化，并成功 将 pKa 值调节至 5.0。激发波长为 600 nm 时，探针的整体发射处于 625-850 nm。HeLaI中文摘要几类近红外荧光探针的设计合成及其应用细胞的成像实验表明其中一个探针（探针 6a）可对溶酶体进行特异性标记，并且同 时具备了近红外激发（633 nm）与近红外发射（650-790 nm）的性质。3. 基于光诱导电子转移机理，两个萘罗丹明类近红外 pH 探针（探针 7a-7b）被 设计合成。它们都在 pH = 2.0-5.0 之间展现出 OFF-ON 型的 pH 响应荧光变化，pKa 值分别为 3.28，3.25，增强倍数分别可达 272，114 倍。两个探针又被进一步应用于 小鼠的消化道成像，探针 7b 由于同时具备近红外激发（663 nm）与发射（700-870 nm） 性能，体内成像效果明显优于探针 7a。该体系表明萘罗丹明是设计基于光诱导电子 转移机理类探针的新型近红外发色团。4. 两个含邻苯二胺基团的萘罗丹明类衍生物（探针 10a-10b）被设计合成，并研 究了它们作为近红外荧光探针检测一氧化氮的吸收发射性能。一氧化氮存在时，其中 一个探针（探针 10a）在 681 nm 处荧光增强 3 倍，而另一个分子探针（探针 10b）表 现出 OFF-ON 的荧光变化，荧光强度在最大发射 750 nm 处增强 35 倍。同时，探针 在常见离子，氨基酸，活性氧和氮存在下，对一氧化氮有很好的选择性，并能在酸性 和中性条件下工作。细胞成像实验表明其中一个探针分子（探针 10b）能实时检测细 胞内的一氧化氮。关键词：荧光探针；近红外；氢离子；一氧化氮作者：刘武 指导老师：葛健锋 教授孙如 副教授几类近红外荧光探针的设计合成及其应用英文摘要Design and synthesis of several near-infrared molecular fluorescent probes for biological applicationAbstractNear-infrared probes are especailly preferred for biological detection and bioimaging since near-infrared light could avoid the influence of background autofluorescence from organisms, minimize damage to biological sampl