建立分支dna技术用于hbv dna定量并评价微阵列芯片检测hbv耐药的性能特点-establish branched dna technology to quantify hbv dna and evaluate the performance characteristics of microarray chip in detecting hbv drug resistance..docxVIP

下载本文档

3
0
约4.56万字
约 61页
2018-05-28 发布于上海
举报
版权申诉

建立分支dna技术用于hbv dna定量并评价微阵列芯片检测hbv耐药的性能特点-establish branched dna technology to quantify hbv dna and evaluate the performance characteristics of microarray chip in detecting hbv drug resistance..docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

建立分支dna技术用于hbv dna定量并评价微阵列芯片检测hbv耐药的性能特点-establish branched dna technology to quantify hbv dna and evaluate the performance characteristics of microarray chip in detecting hbv drug resistance.

万方数据万方数据目录英汉缩略名词对照表 2 中文摘要 4 英文摘要 7 研究内容第一部分建立分支 DNA 技术定量检测 HBV DNA 及初步临床应用一、前言 10 二、材料和方法 13 三、结果 20 四、讨论 33 第二部分 DNA 微阵列芯片技术在乙肝病毒耐药基因检测中的应用及其评价一、前言 35 二、材料和方法37 三、结果 41 三、讨论 45 全文总结 47 参考文献 48 综述 51 致谢 61 2 英汉缩略语名词对照（Abbreviation）英文缩写英文全称中文名称 ADV Adefovir Dipivoxil 阿德福韦酯 bDNA Branched DNA 分支 DNA bp Base pair 碱基对 cccDNA covalently-closed circular DNA 共价闭合环状 DNA CHB Chronic viral hepatitis type B 慢性乙型肝炎 Ct Cycle threshold （PCR 荧光信号）阈值循环数 CT Chlamydia trachomatis 沙眼衣原体 CV Coefficient of variation 变异系数 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 EDTA Ethylenediaminete traacetic acid 乙二胺四乙酸 ETV Entecavir 恩替卡韦 HBV Hepatitis B Virus 乙型肝炎病毒 HCV Hepatitis C Virus 丙型肝炎病毒 HEPES 4- (2- Hydroxyethyl)- 1- piperazineethanesulfonic acid 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 HPV Human papillomavirus 人乳头瘤病毒 HSV Herpes simplex virus, 单纯疱疹病毒 3 IFN Interferon 干扰素 LAM LdT Lamivudine Telbivudine 拉米夫定替比夫定 MALDI- TOF MS matrix assisted laser desorp tion/ionization time-of-flight mass spectrometry 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 min Minute 分钟 mg Milligram 毫克 NUCs nucleostide analogues 核苷酸类似物 ORF Open Reading Frame 开放读码框 RFLP restriction fragment length polymorphism 限制性片段长度多态性 Rnasin RNA inhibitor 核糖核酸酶抑制剂 rpm rotate per minute 每分钟转速 RT-qPCR Real-time Fluorescent Quantitative Polymerase Chain Reaction 实时荧光定量聚合酶链反应 SDS Sodium Dodecyl Sulfate 十二烷基硫酸钠 4 建立分支 DNA 技术用于 HBV DNA 定量并评价微阵列芯片检测 HBV 耐药的性能特点中文摘要目的 1. 建立分支 DNA 信号放大技术（branched DNA, bDNA）定量检测乙型肝炎病毒 DNA（Hepatitis B Virus DN A, HBV DNA），并评价其性能特点及其临床应用价值，为将该技术应用于 HBV 感染的诊断和疗效判断奠定基础。 2. 评价 DNA 微阵列芯片法检测慢性乙型肝炎拉米夫定和阿德福韦酯耐药突变的性能特点及其临床应用价值。方法 1. 根据文献报道的中国HBV B、C型基因组全序列，设计一套碱性磷酸酶标记的探针，包括：捕获探针组、特异性捕获剂、标记体、前放大体探针组、放大体探针组和标记探针组，将捕获探针包被在96孔聚氯乙烯板上，依序与HBV DNA、前放大体探针组、放大体探针组、标记探针组杂交，将杂交信号级联放大，用北京源德生物有限公司JETLIA-962型发光仪检测化学发光信号值，计算结果。 2. 制备标准品：收集 5 例高 HBV DNA 载量的 HBV 感染者血清标本共 5 ml 作为标准品，用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time Fluorescent Quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）法连续 4 天对其 HBV DNA 进行定量，共定量 20 次，其平均值 1.87E+08 c