微生物学实验01课件.pptxVIP

医学微生物学实验（一）;平时成绩 8分 操作考试成绩 12分 说明： 旷课：一次扣2分，四次总成绩不及格； 作业：教师评分C以下一次扣0.5分；;实验室内的“宜”与“忌”;1.熟悉革兰氏染色法原理、 步骤、结果、意义 2.掌握油镜的使用 3.掌握细菌的基本形态和特殊结构; 革兰氏染色法是丹麦年轻的医师、细菌学家Hans Christian Joachim Gram于1884年（时年31岁）创建的,至今仍广泛应用用于细菌分类和鉴别。;1.1 革兰氏染色法原理;化学学说： 碘液在菌体内与结晶紫结合后又和菌体内核糖核酸镁盐-蛋白质复合物结合，此结合物不易被丙酮酒精脱掉，呈革兰氏染色阳性。因革兰氏阴性菌缺乏核糖核酸镁盐，故对碘与结晶紫结合物摄取少，且不牢固，易被丙酮酒精脱色而呈革兰氏阴性。 ;渗透学说： G+菌细胞壁厚20~80nm,脂类含量低，肽聚糖含量高（占细胞壁干重的50%~80%），15~50层 G-细胞壁10~15nm,脂类含量高，肽聚糖含量低（占细胞壁干重的5%~20%），1~2层。肽聚糖是结晶紫发生静电结合的物质。 G+菌结构致使结晶紫易进难出，而G-菌结构是难进易出 G+脂类少，无外膜，乙醇既能抽取结晶紫复合物，也能脱水，由于没有外膜保护，水很容易被脱出，肽聚糖网眼缩小，染色剂不易渗出，仍留在肽聚糖分子上，使脱色不明显，仍显紫色，难以在复染时候染成红色。G-细胞壁脂类含量高，具有脂类外膜，阻止乙醇脱水时水外渗，从而保持原肽聚糖分子网眼大小，另一方面由于细胞壁中的脂类被乙醇溶解，增加细胞壁通透性，乙醇很容易进入细胞内，将染色复合物提取出来，使菌体呈现无色，从而容易被复红染成红色。 ;涂片 干燥 固定;1.2 革兰氏染色步骤;注意事项： 涂片：均匀，不过多、过厚； 固定温度：适宜 水洗：不直接冲洗涂面，水流不过大 乙醇脱色：严格控制在30s以内 菌株选用：幼龄;1.3 革兰氏染色意义;实验思考;显微镜使用方法;油镜使用 ;金黄色葡萄球菌(10×40); 实验完毕后的处理：; 细菌的基本形态; 细菌的基本形态; 细菌的基本形态; 细菌的特殊结构; 细菌的特殊结构; 细菌的特殊结构;1，确保油镜头擦拭干净！载玻片放入指定地点2，下周实验课上???前交实验报告，值日生留下下周实验课（细菌的人工培养）