选修一 专题5 DNA和蛋白质技术课件.pptVIP

[示例]　回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。 (1)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的 是 (　　) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低 而减小 B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精 的物质而得到较纯的DNA C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂 D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应 (2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成 功，其原因最可能是 (　　) A．操作方法不对 B．人血含DNA太少 C．NaCI溶液浓度太高 D．加二苯胺太少 (3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图： ①正确的操作顺序是______________________________。 ②上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是________________和________________。 ③上图A步骤中所用酒精必须是经过________才能使用， 该步骤的目的是________。 ④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加________试剂，沸水浴，如果出现________则该丝状物的 主要成分为DNA。 [解析]　(1)DNA在NaCl溶液中的溶解规 律如图： DNA不溶于酒精等有机溶剂，在沸水 浴条件下，DNA遇二苯胺后呈现蓝色。 (2)由于人属于哺乳动物，成熟的红细 胞中不含细胞核、线粒体，所以几乎不 含DNA，很难提取到DNA。 (3)DNA粗提取的过程为：红细胞加蒸馏水，胀破后过滤→用2 mol/L NaCl溶解→过滤除去不溶杂质加蒸馏水，析出含DNA的黏稠物→过滤→黏稠物溶解在2 mol/L NaCl中→过滤→溶于95%酒精进一步提纯，所以根据图示及以上分析，正确操作顺序为C→B→E→D→A。 [答案]　(1)B　(2)B　(3)①C→B→E→D→A ②加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出 ③充分预冷提取含杂质较少(或较纯净)的DNA　④二苯胺(或甲基绿)蓝色(蓝绿色) 1．实验步骤中3次加入NaCl溶液的浓度和作用：浓度均为2 mol/L，作用均为溶解DNA。 2．实验步骤中2次加入蒸馏水的目的：第一次加入是使鸡 血细胞吸水涨破，第二次是稀释NaCl溶液至0.14 mol/L， 从而析出DNA。 3．实验中4次过滤的比较 第一次过滤 第二次过滤 第三次过滤 第四次过滤 滤液中 含DNA的核物质 DNA 溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 DNA 第一次过滤 第二次过滤 第三次过滤 第四次过滤 纱布上 细胞膜、核膜等残片 溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 DNA 不溶于2 mol/LNaCl溶液的杂质 过滤前 加入的 物质 蒸馏水 NaCl溶液 蒸馏水 NaCl溶液 过滤的 目的 去除细胞膜、核膜等杂质 去除不溶于2mol/L NaCl的杂质 去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 4．其他注意事项 (1)甲基绿可将DNA染成绿色且不需水浴加热，二苯胺鉴定 DNA属于颜色反应，需要沸水浴加热5min，可使DNA呈 蓝色。 (2)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影 响鉴定效果。 (3)DNA进一步提纯(第四次过滤的滤液)时要选用预冷的95% 的酒精，作用如下： ①抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解； ②降低分子运动，易于形成沉淀析出； ③低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 点击此图片进入“创新演练·大冲关” * * 一、DNA的粗提取与鉴定 1．提取原理：DNA与杂质的 不同，DNA与杂质对酶、 高温、洗涤剂的耐受性不同。 2．实验设计 (1)材料的选取：选用DNA含量相对 的生物组织，如鸡 血、菜花、洋葱等。 (2)破碎细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃 棒搅拌，