血液学血细胞化学染色概述.pptVIP

第三章  血细胞化学染色 ;一、概述 （一）研究对象 外周血和骨髓新鲜涂片单个细胞中的化学物质： 酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等 ;  （二）临床应用 ;   二、常用细胞化学染色方法; 过氧化物酶染色 （peroxidase,POX）;POX ;【结果判断】 -、+、++、+++、++++ 弱阳性 颗粒小，分布稀疏 阳性 颗粒稍粗，分布较密集 强阳性 颗粒粗大，密布于整个胞浆;【正常血细胞染色反应】 1.粒细胞系统 POX主要存在于粒系细胞中。 分化差的原粒细胞阴性; 分化好的原粒细胞至中性成熟粒细胞各 阶段均呈阳性，阳性反应程度随细胞的成 熟逐渐增强。 ; 2.单核细胞系统 阴性或弱阳性 3.淋巴细胞系统 红细胞系统 巨核细胞系统 阴性 浆细胞 组织细胞 ;;【临床评价】 ; 1. 急性髓细胞白血病 （1）急性粒细胞白血病 阳性反应 （2）急性单核细胞白血病 弱阳性反应 ; 2. 急性淋巴细胞白血病 阴性反应或阳性率 3%(残留原粒细胞) ; 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 （neutrophilic alkaline phosphatase，NAP）;磷酸萘酚钠 （基质中）;【结果判断】 胞浆中有紫黑色颗粒为阳性(+~++++） ;【正常血细胞染色反应】 ;; 2.NAP积分值 计数100个成熟中性粒细胞（杆状和分叶）,分别记录其分级情况： ; (-) 0分 (+) 1分 (++) 2分 (+++) 3分 (++++) 4分 阳性率 全部阳性反应细胞之和 积分值 各种阳性程度细胞的分值之和 ; 3.参考值 积分值 35-70分 ( 各实验室参考值不同); 【临床评价】 （1）细菌性感染与病毒性感染 （尤其是化脓性感染） 明显增加 无明显变化 ;(2）类白血病反应与慢性粒细胞白血病 明显增加 明显下降且常为零分， 缓解时又上升到正常 ;过碘酸-雪夫反应 ( 糖原染色 )（periodic acid-Schiff reaction，PAS）;双醛基;【结果判断】;【正常血细胞染色反应】; 2.红细胞系统 阴性 3.单核细胞系统 　　绝大多数阳性呈细颗粒，有时分布于细胞边缘的阳性颗粒较粗大。 ; 4.淋巴细胞系统 大多数淋巴细胞呈阴性； 少于20%淋巴细胞呈粗颗粒状或块状阳性。 5.巨核细胞系统 呈颗粒状或块状阳性（含血小板）。 ;【临床评价】;; 3.鉴别急性白血病类型;（2）急性粒细胞白血病 少数阳性，呈细颗粒状或均匀红色。 （3）急性单核细胞白血病 可阳性，呈细颗粒状、弥散分布，有时 胞质边缘处颗粒较粗大。; α-醋酸萘酚酯酶染色（α-naphthol acetate esterase，α-NAE）;α-醋酸萘酚酯酶 （细胞内）;【结果判断】 胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状沉淀为阳性。; 氟化钠抑制试验 在基质液中加入适量NaF,其余染色方法同上。 两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率或阳性积分。; ;【正常血细胞染色反应】; 2.粒细胞系统 原粒细胞阴性或弱阳性 以下阶段为弱阳性 3.淋巴细胞系统 多数阴性，少数弱阳性 ;;【临床评价】; 铁 染 色 （ferric stain）;亚铁氰化钾; 【结果判断】 幼红细胞核染色为鲜红色,铁粒呈蓝绿色。 ; 细胞外铁 低倍镜观察涂片尾部和骨髓小粒,细 胞外铁位于幼红细胞外或骨髓小粒巨噬 细胞浆内，呈蓝色颗粒状、小珠状或团 块状。 ; 再用油镜判断阳性程度，根据铁量 多少分五级: （-） （+） （++） （+++） （++++）;; 细胞内铁 存在于中幼红细胞、晚幼红细胞及成熟红细胞中的铁。 油镜下计数1