第7章真核基因表达调控中.ppt

第七章 真核基因表达调控 第三节 真核基因的转录 1.启动子 1.1核心启动子：TATA框启动子 1.2上游启动子元件：不典型的启动子 富含GC，无TATA框的基因转录 转录起始子与无TATA框、GC框的基因转录 第1页/共28页 真核生物RNA聚合酶Ⅱ的启动子结构 第2页/共28页 第三节 真核基因的转录 2.转录模板：一个转录单元，包括转录起始位点到终止处的全部DNA序列。 3.RNA聚合酶II：多个亚基组成。 4.转录所需的蛋白因子：参与转录的起始、延伸和终止。 第七章 真核基因表达调控 第3页/共28页 第三节 真核基因的转录 5.增强子 增强子是指能使它连锁的基因转录频率明显增强的DNA序列。 第4页/共28页 SV40增强子结构示意图 第三节 真核基因的转录 第七章 真核基因表达调控 第5页/共28页 第三节 真核基因的转录 5.增强子 5.1特性 增强效应十分明显 增强效应与其位置和取向无关 大多为重复序列 其增强效应有严密的组织和细胞特异性 没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应 许多增强子还受外部信号的调控 第6页/共28页 第三节 真核基因的转录 5.增强子 增强子的功能是可以累加的。SV40增强子序列可以被分为两半，每一半序列本身作为增强子功能很弱，但合在一起，即使其中间插入一些别的序列，仍然是一个有效的增强子。因此，要使一个增强子失活必须在多个位点上造成突变。对SV40增强子而言，没有任何单个的突变可以使其活力降低10倍。 第7页/共28页 第三节 真核基因的转录 5.增强子 5.2增强子的作用原理 影响模板附近DNA 的双螺旋结构，以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子与启动子之间“成环”连接，活化基因转录； 将模板固定在细胞核内特定位置，促进RNA聚合酶II在DNA链上的结合和滑动； 增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶II进入染色体结构的“入口”。 第8页/共28页 增强子作用机理 第9页/共28页 一个增强子可通过将蛋白质带到启动子附近行使其功能。增强子在长线形DNA的相反末端不起作用，但当DNA在蛋白质桥作用下连接成环状时，却能有效地发挥作用。增强子和启动子在两个分开的DNA环上时不起作用，但两环连接时却发生作用。 非活化结构 活化结构 蛋白质桥 相互连接成环 第10页/共28页 第四节 反式作用因子对转录的影响 根据各个蛋白质成分在转录中的作用，能将整个复合体分为3部分： ① 参与所有或某些转录阶段的RNA聚合酶亚基，不具有基因特异性； ② 与转录的起始或终止有关的辅助因子，不具有基因特异性； ③ 与特异调控序列结合的转录因子。 第11页/共28页 真核生物中转录因子活性调节的主要方式 无蛋白质 蛋白质合成 第12页/共28页 真核生物中转录因子活性调节的主要方式 第13页/共28页 真核生物中转录因子活性调节的主要方式 第14页/共28页 1.DNA结合结构域基序 a.螺旋-转角-螺旋结构（Helix-turn-helix） 是最早发现于原核生物中的一个关键因子，该结构域长约20个aa，主要是两个α-螺旋区和将其隔开的β转角。其中的一个被称为识别螺旋区，因为它常常带有数个直接与DNA序列相识别的氨基酸。 第四节 反式作用因子对转录的影响 第15页/共28页 螺旋-转角-螺旋结构 第16页/共28页 螺旋－转角－螺旋（helixturnhelix，HTH）基序 第17页/共28页 b.锌指结构（Zinc finger） 长约30个aa，其中4个氨基酸（2个Cys（半胱氨酸），2个His（组氨酸））与一个Zinc原子相结合。与Zinc结合后锌指结构较稳定，有Zinc参与时才具有转录调控活性 。 第四节 反式作用因子对转录的影响 第18页/共28页 锌指结构 第19页/共28页 锌指(zinc finger) 第20页/共28页 c.同源域蛋白（Homeodomain） 最早来自控制躯体发育的基因，长约60个氨基酸，其中的DNA结合区与 helix-turn-helix motif相似，人们把该DNA序列称为homeobox。主要与DNA大沟相结合。 第四节 反式作用因子对转录的影响 第21页/共28页 d.亮氨酸拉链（Leucine zippers） 是亲脂性（amphipathic）的α螺旋，包含有许多集中在螺旋一边的疏水氨基酸，两条多肽链以此形成二聚体。每隔6个残基出现一个亮氨酸。由赖氨酸（Lys）和精氨酸（Arg）组成DNA结合区。 第四节 反式作用因子对