M13-06实验六活性污泥中细菌的纯种 环境工程微生物学教材.ppt

实验六; 一、实验目的; 二、主要内容; 2.平板表面涂布和浇注平板法;生物安全操作箱; (1)稀释样品：本实验样品（材料）为活性污泥。将无菌水依次排列，包括锥形瓶(90mL) 1份、试管（9mL）3份，分别编号为10-1、10-2、10-3、10-4，先用10mL 移液管取10mL活性污泥至10-1 的锥形瓶中（内装有9０mL无菌水，即为10-1 浓度），充分摇匀、打碎，接着用1mL移液管取1mL 10-1的样品至试管（内装有9mL无菌水，即为10-2）中，同法稀释至10-4（或10-５）。此过程中移液管连用，故在每个稀释度之间必须将移液管吸洗3次，并使样品混合均匀。稀释倍数的确定视被测样品的细菌浓度（估计），取能在每个平板上长出30～300个菌落的稀释倍数为宜。 ;水样稀释、分离、接种过程 ; （2）取样品至培养皿: 从10-4 稀释度开始，用另一支移液管取1mL稀释液至培养皿中，每一稀释度重复2～３个培养皿（培养皿须编号），共做2～３个稀释度（10-4、10-3或10-５ ）。 （3）倒培养基: 在上述每个培养皿内倒入约15mL 已融化并冷却至50℃左右的培养基，随即快速而轻巧地摇匀，平放于桌面。 以上培养皿均应编号（组号、菌号等）。 （4）培养: 待平板完全凝固后，倒置于37℃培养箱中培养24h（或48h）。; 四、实验材料、器皿 活性污泥、培养箱、水浴锅、接种环等。 五、注意事项 本实验用品繁多，内容丰富，须按要求规范操作。 由于是组合实验,本次实验与淀粉酶实验以及综合性实验等穿插在一起,预习实验内容更为重要。