褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤及认知功能影响机制的实验研究 （一）.pdfVIP

褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤及认知功能影响机制的实验研究 中文摘要 褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤及认知功 能影响机制的实验研究 中文摘要 第一部分 褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤及认知功能的 影响 目的：研究褪黑素 （Melatonin,MT ）对大鼠蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage ,SAH）后继发性脑损伤及认知功能障碍的影响。 方法：任选 80 只成年雄性 SD 大鼠，随机分为以下四个实验组：正常组、SAH 组、安慰剂治疗组和褪黑素治疗组，将SD 大鼠股动脉非肝素化动脉血通过 1.0ml 注 射器注入大鼠视交叉前池，从而建立实验性蛛网膜下腔出血动物模型。在褪黑素治疗 组，模型建立后的第2 小时、24 小时及36 小时，腹腔注射褪黑素溶液（150mg/kg）。 在安慰剂治疗组，模型建立后的第2 小时、24 小时及36 小时，腹腔注射生理盐水。 观察SD 大鼠SAH 后神经行为功能的变化，同时进行神经行为功能评分。SAH 动物 模型建立完毕第 48 小时处死部分大鼠，取出大鼠额颞底皮层脑组织做标本，采用 TUNEL 荧光染色与FLUORO-JADE B 荧光染色检测大鼠额颞底皮层脑组织神经元细 胞凋亡及坏死比率，剩余未处死SD 大鼠在SAH 动物模型建立完毕第48 小时开始进 行Morris 水迷宫试验，检测SD 大鼠的认知功能障碍。 结果：1.与正常组相比，SAH 组SD 大鼠的神经认知功能水平降低，活动能力及 饮食能力降低（P0.05 ）；褪黑素组SD 大鼠与安慰剂组SD 大鼠相比，神经认知功能 明显改善，食欲及活动能力明显好转 （P0.01 ）；SAH 组 SD 大鼠和安慰剂组 SD 大 鼠之间无统计学意义 （P0.05 ）。2. TUNEL 染色结果显示：与正常正常组比较，SAH 组SD 大鼠神经元细胞的凋亡百分显著增高 （P0.01 ），褪黑素治疗组SD 大鼠神经元 细胞凋亡百分比明显低于安慰剂治疗组 SD 大鼠 （P0.01 ），而安慰剂治疗组与SAH 组 SD 大鼠神经元细胞的凋亡百分比比较无统计学差异 （P0.05 ）。3. Fluoro-Jade B I 中文摘要 褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤及认知功能影响机制的实验研究 荧光染色检测各组大鼠神经元细胞的坏死情况，结果显示：与正常组相比，SAH 组 SD 大鼠神经元细胞坏死的百分比显著增高 （P0.01），褪黑素治疗组SD 大鼠神经元 细胞坏死的百分比显著低于安慰剂治疗组SD 大鼠 （P0.05 ），而安慰剂治疗组SD 大 鼠与SAH 组SD 大鼠神经元细胞坏死的百分比无统计学差异 （P0.05 ）。5.在Morris 水迷宫试验测试中，与正常组相比，SAH 组SD 大鼠及安慰剂组SD 大鼠的空间学习 记忆功能明显下降（P0.01 ），且SAH 组SD 大鼠及安慰剂组SD 大鼠之间无统计学 差异（P0.05 ）。褪黑素组SD 大鼠与安慰剂组SD 大鼠相比，SD 大鼠的空间学习记 忆能力有显著提高 （P0.01 ）。 结论：褪黑素 （Melatonin,MT ）能够降低SD 大鼠蛛网膜下腔出血后继发性神经 元细胞凋亡及坏死水平，同时明显改善SD 大鼠SAH 后的空间学习等认知功能障碍。 关键词： 蛛网膜下腔出血；Morris 水迷宫；褪黑素；认知功能；TUNEL ； 第二部分 褪黑素对大鼠蛛网膜下腔出血后TLR4 介导的炎性信号通路 相关蛋白表达影响的研究 目的：建立大鼠蛛网膜下腔出血 （SAH，subarachnoid hemorrhage ）模型，观察 褪黑素治疗后，TLR4 介导的炎性信号通路相关蛋白表达的变化，如高迁移率族蛋白 B1 （HMGB1 ），Toll 样受体 4 （TLR4 ），核转录因子（NF- κB ），髓样分化因子 88 （MyD88 ），白介素-1 β（IL-1 β），肿瘤坏死因子α（TNF- α），白介素-6 （IL-6 ）， 和诱导型一氧化氮合酶等。