壳聚糖絮凝法精制川牛膝总多糖酶提取液的工艺研究.docVIP

壳聚糖絮凝法精制川牛膝总多糖酶提取液的工艺研究-机电论文 壳聚糖絮凝法精制川牛膝总多糖酶提取液的工艺研究 成悦刘傲霞夏玉婷谷旭晗韩伟 （华东理工大学中药现代化工程中心，上海200237） 摘要：以壳聚糖为絮凝剂对川牛膝的总多糖进行了絮凝纯化研究。通过单因素考察及正交试验得到优化的工艺条件为：絮凝温度45℃、壳聚糖用量0.4mL/g生药量、絮凝时间2h、药液浓缩比1:12、药液pH＝4。此时，多糖保留率76.32%、脱蛋白率64.25%，与传统醇沉工艺相比，絮凝法得到的多糖保留率和纯度较高。 关键词 ：壳聚糖；絮凝；川牛膝；总多糖；试剂 StudyontheFlocculatingPurificationProcessofTotalPolysaccharidesfromCyathulaOfficinalisKuanbyUsingChitosan ChengYueLiuAoxiaXiaYutingGuXuhanHanWei （EngineeringCenterforTraditionChineseMedicineModernization,EastChinaUniversityofScienceandTechnology, Shanghai200237） Abstract：Theessaywasaimedatstudyingflocculatingpurificationoftotalpolysaccharidesbyusingchitosan.Theoptimumconditionswereobtainedthroughsinglefactorandorthogonalexperiment.Theresultswereasfollows:thetemperaturewas45℃,dosageofchitosanwas0.4mL/grawmaterial,flocculationtimewas2h,solutionconcentrationratiowas1:12,pHofsolutionwas4.Underthiscondition,polysaccharidesretentionratewas76.32%,deproteinizingrateof64.25%.Comparedwiththetraditionalalcoholprecipitationprocess,theretentionrateandpurityofthepolysaccharideoftheflocculationpurificationprocessarehigher. Keywords：chitosan;flocculate;CyathulaofficinalisKuan;totalpolysaccharide;reagent 0引言 川牛膝为苋科植物川牛膝（CyathulaofficinaIisKuan）的干燥根，为著名川产药材，具有补肝肾、强筋骨、治疗腰膝酸麻及肝阳眩晕、散癖血、消肿痛等功效。川牛膝多糖是从川牛膝根中提取的一种生物活性多糖，相对分子质量1000～2200，是高度分支的果聚糖。现代药理研究表明，川牛膝多糖具有促进红细胞免疫、抗肿瘤、对抗环磷酰胺所致外周白细胞减少等疗效。 絮凝技术是一种简单有效的固液两相体系分离方法，壳聚糖作为一种天然的链状高分子絮凝剂，由葡萄糖胺通过β-1，4-糖苷键连接而成。由于分子中含有氨基，使壳聚糖在酸性条件下带有正电荷，可发挥电中和与吸附架桥的双重絮凝作用，并具有安全、无毒、稳定的优点。 本文以多糖保留率和脱蛋白率为指标，考察壳聚糖对川牛膝总多糖酶提取液的絮凝纯化工艺，并通过数据分析优化工艺参数。 1材料与方法 1.1材料与设备 1.1.1药材 川牛膝，产地为四川，购于上海雷允上药店。将川牛膝粉碎过筛成干粉后进行预处理：用10倍量的体积分数95%的工业乙醇回流1h，冷却至室温，取上清液回收乙醇，烘干药渣，装袋于阴凉处储存备用。 1.1.2主要试剂 纤维素酶，上海楷洋生物技术有限公司；95%工业乙醇；36%浓盐酸、氢氧化钠、5%苯酚溶液、98%浓硫酸等均为国产分析纯；葡萄糖为标准品（＞95%），上海凌峰化学试剂有限公司；牛血清白蛋白和考马斯亮蓝G-250均为分析纯，上海源聚生物科技有限公司；壳聚糖，上海伟康生物制品有限公司。 1.1.3主要仪器 UV1900PC紫外可见分光光度计，上海亚研电子科技有限公司；pHS-2C数字式pH计，上海雷磁仪器厂；AL204分析天平，上海梅特勒-托利多仪器有限公司；SHB-Ⅲ型循环水真空泵，巩义市英峪予华仪器厂；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器，巩义市英峪予华仪器厂；RE-52C旋