il10 il13 spb及相关微卫星 hdefb1多态性与中国汉族人慢性阻塞性肺疾病易感性关联研究-association between il10 il13 spb and related microsatellite hd efb 1 polymorphism and susceptibility to chronic obstructive pulmonary disease in chinese han nationality.docx

华中科技大学搏;t;学位论文缩暗语一览表CI可信区间COPD慢性阻塞性肺疾病EDTA乙二版囚乙酸FEVl第一秒用力呼气容积FVC用力肺活量hBD-l人P防御素斗HO幡:血红索氧合酶崎lIL崛1O(13)臼细胞介素唰10(13)mEH微粒体环氧化物水解酶MMP基质金属蛋白酶OR机会比PCR聚合酶链式反应PIC多态信息含量PS肺表面活性物质RFLP限制性片段长度多态性SDS十二烧基磺酸纳sICAM幡1分泌型细胞向蒙古附分子..1SNP单个核背酸多态性SP-B肺表面活性物质相关蛋白心SSCP单链构像多态性TGF耐?1转化生长因子-?1TIMP余属蛋白酶组织抑制因子TNF耐G肿瘤坏死囚子响GTr?s三经甲基氨基甲烧Y-GCSy.谷氨酸半脱氨酸合酶TEMEDN，N，Nt，Nt?囚甲基乙二版华中科技大学博士学位论文IL-I0、IL-13、SP-B及相关微卫星、HDEFBl多态性与中国汉族人慢性阻塞性肺疾病易感性关联研究摘要慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease，COPD)发病是环境因素与遗传因素共同作用的结果，吸烟是COPD最主要的致病因素，不同个体之间存在COPD易感性差异。自细胞介素(ínterleukin，IL)-lO多态性与多种炎症性疾病易感性有关，IL-13基因多态性与多种变态反应性疾病易感性相关，肺表面活性物质相关蛋白(surfactantprotein，SP)-B是肺表面活性物质的重要组分，直接决定肺表面活性物质的代谢和活性，影响肺的通气和免疫功能，入自-防御素-1(humanbetadefensin-1.hBD-l)是主要由上皮细胞表达的-种小分子阳离子蛋白，参与呼吸系统先天性免疫。由于COPD与肺部的异常炎症反应有关，患者常伴有气道高反应性，而且呼吸道感染是COPD发病的独立危险因素，我们对IL-I0、IL-13、SP-B、hBD-l编码基因HDEFBl及SP-B相关微卫星D25388、D2S2232多态性与中国汉族人COPD易感性之间的关系进行了研究q第一部分IL-I0基因启动子多态性与中国汉族人COPD易感性关联研究目的:研究中国汉族人IL-IO基因启动子单个核营酸多态性(singlenucleotidepolymorphism，SNP)及其与COPD易感性之间的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphismPCR-RFLP)分和方法，分别检测94名健康吸烟者和88例吸烟COPD患者白细胞IL-I0基因启动子-1082G/A、-819C/T、-592CIA三个SNP位点基因型。结果:实验共发现11种启动子基因型，以AA?TT?AA、AA?TC?AC、2华中科技大学博士学位诠文AA?TC?AA基因型多见:通过对11种启动子基因型进行分析，新发现ATC和ACA两种单倍型:健康吸烟者和吸烟COPD患者IL叩10基因启动子-1082G/A、-592C/A位点基因型分布频率差异无显著性，而-819C/T多态性位点基因型分布频率具有显著性差异〈χZ=9.17步PO.Ol);-819丁等位基因相对于C等位基因患COPD的机会比为1.57，95%可信区问为上02-2ι3;中国汉族人IL寸。基因启动子等位基因频率与白种人和黑人之间存在显著性差异。结论:中国汉族人COPD易感性与民-10基因启动子-819C/T位点多态性有关:中国汉族人IL-IO基因启动子至少存在ATA，ACC、GCC、ATC、ACA5种单倍型。第二部分IL-13基因多态性与中国汉族人COPD易感性关联研究目的:研究中国汉族人IL-13基因1103C/T，4257G/A、4738G/ASNP位点多态蚀与COPD易感性的关系。方法:应用PCR-RFLP分析及PCR由单链构像多态性singlestrandconformationpolymorphism，SSCP)分析方法，检测94名健康吸烟者和88例吸烟COPD患者IL-13基因启动子1103C/T、4257G/A、4738G/A三个SNP位点基因型分布情况:用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆孔叩门水平。结果:COPD组与对照组4257G/A、4738G/A位点基因裂分布频率和等位基因频率无显著性差异(PO.l);对照级1103C/T位点CC基因型频率及C等位基因频率高于COPD组(PO.05)，C等位基因相对于T等位基因患COPD的机会比为O.56，95%可信区间为0.34-0.910血浆IL-13浓度与4257G/A及4738G/A位点基因型无关(PO.1)量1103CC基因型携带者血浆IL-13水平显著低于另外两种基因裂携带者CPO.05