il15在类风湿关节炎发病机制中作用的研究-study on the role of il15 in the pathogenesis of rheumatoid arthritis.docx

目录中 文 摘 要············································································1ABSTRACT4第一部分 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜病理改变的影响7 第二部分 IL-15 与其他细胞因子（TNF-Α、IL-17）相互作用的研究· 13 第一节 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型血及滑膜 TNF-Α影响························································································ 13 第二节 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎模型滑膜 IL-17 的影响及甲 氨喋呤对二者的影响 ····························································· 21医 学 综 述·········································································· 29致谢············································································· 36IL-15 在类风湿关节炎发病机制中作用的研究华中科技大学同济医学院附属协和医院风湿免疫科 硕士研究生 曾星若导师 黄安斌教授中 文 摘 要IL-15 （Interleukin-15，IL-15）被 Grabstein 等人于 1994 年首先发现，其在体外 有和 IL-2 相似的能促进 T 细胞生长的作用。多种组织和不同的细胞通过不同的刺激 都可以产生 IL-15。近年，许多研究表明，IL-15 在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA) 的发病过程中扮演重要角色。我们研究了 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎（the Collagen induced arthritis，CIA)大鼠模型病理改变的影响以及 IL-15 对 CIA 大鼠滑膜相关细胞 因子的影响，初步探讨 IL-15 在类风湿关节炎发病机制中的作用。一、IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜病理改变的影响目的：研究 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜病理改变的影响，从而 初步了解 IL-15 在类风湿关节炎发病机制中的作用。方法：60 只 wistar 大鼠随机分成 正常 A 组、正常 B 组、模型 A 组、模型 B 组，模型两组建立Ⅱ型胶原诱导性大鼠关 节炎模型。于第二次免疫后，开始在模型 A 组和正常 A 组大鼠踝关节局部每天注射 生理盐水 0.08ml，在正常 B 组和模型 B 组大鼠踝关节局部每天注射 IL-15 0.08ml（含 重组大鼠 IL-15 800μg），于注射两周后处死大鼠，取大鼠踝关节做病理切片观察关节 滑膜的病理改变。结果：关节肿胀程度（大鼠踝关节直径数）：模型 A 组、模型 B 组、 正常 B 组均较正常 A 组关节肿胀明显（P0.05）；而模型 A 组肿胀程度较正常 B 组明 显（P0.05）；模型 B 组肿胀程度又较模型 A 组明显（P0.05）。关节病理积分：模型 A 组、模型 B 组、正常 B 组均较正常 A 组高（P0.05），而模型 A 组较正常 B 组高（P0.05）；模型 B 组又较模型 A 组高（P0.05）。结论：IL-15 可以加重大鼠滑膜增 生、炎症因子浸润及骨破坏，推测其在类风湿关节炎发病中有重要影响。二、IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜相关细胞因子（IL-17、TNF-α）的影响1、IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型血清及滑膜 TNF-α影响目的：研究 IL-15 对Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎模型血清及滑膜 TNF-α的影响， 从而推断其在 RA 发病机制中的作用。方法：120 只 wistar 大鼠随机分为未注射组（Ⅰ 组）、注射组（Ⅱ组），每组均有大鼠 60 只。两组均建立Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠 模型。从第二次免疫后，开始在注射组大鼠踝关节局部每两天注射 IL-15 0.08ml／只（含重组大鼠 IL-15 1600μg），连续 8 周。同时，在未注射组大鼠踝关节局部每两天 注射生理盐水 0.08ml/只，持续 8 周。分别在第 24、34、44、54、70 天时，每组随机 取造模成功大鼠 8－9 只，2%戊巴比妥钠(3ml/kg)腹腔注射麻醉后，取大鼠的心脏血及 踝关节备用。用 ELISA 方法测定大鼠血清 TNF-α值，而大鼠关节做石蜡切片后进行 免疫组化染色，测定大鼠关节滑膜 TNF