化学生物学研究中的分析检测基本方法.pptx

化学生物学研究中的分析检测方法;《化学生物学学科前沿与展望》;有机小分子-生物大分子相互作用分析检测;3. 蛋白质-DNA相互作用分析检测 蛋白质-DNA相互作用分析新技术 蛋白质-DNA相互作用的单分子检测 核酸适体识别行为的分析检测 4. DNA-DNA相互作用分析检测 荧光DNA分析 电化学DNA分析 比色DNA分析 免标记DNA分析 基于纳米制造技术的DNA分析;5. RNA参与的生物大分子相互作用检测 RNA-DNA相互作用 RNA-蛋白质相互作用 miRNA的分析检测 6. 糖-蛋白质相互作用分析检测 基于微阵列技术的糖-蛋白质相互作用分析 基于凝集素探针的糖-蛋白质相互作用分析;1. 单分子检测 生物分子的非均一性 检测灵敏度的提高使单个分子信号检测成为可能，为在分子水平研究复杂生命现象，揭示生命过程的分子机制带来机遇 研究手段上可分为： 光学检测方法（包括光学成像和光谱测定） 电学检测方法 力学检测方法 扫描探针显微成像方法 可分为离体和在体 应用体系：蛋白质折叠，酶催反应，离子通道，信号转导，DNA、RNA、DNA结合蛋白的相互作用及基因调控，膜结构，分子马达，细胞内复杂结构等。;蛋白质亚基组成的计量方法 用于细胞中蛋白质结构的实时研究 加州大学Ulbrich等（2007） 1~ 4个GFP的四聚体离子通道蛋白： 对细胞中标记荧光基团的蛋白进行单分子荧光成像, 通过光漂白台阶步数分析、荧光强度分布分析、扩散运动分析等途径定量表征蛋白的组成。 中科院生物物理所徐涛等（2008） 提出钙离子释放激活钙通道蛋白的亚基构成 中科院化学所方晓红等（2009） 提出丝氨酸/苏氨酸激酶类受体激活新模式 ;分子间相互作用的动力学参数测定 ;超分辨成像技术 ;细胞内单分子的检测方法 ;原子力显微镜单分子成像与单分子力谱法;重要发展方向;2.单细胞检测 高通量单细胞分析 流式细胞仪 质量细胞仪 (2011) 结合流式细胞仪与ICP-MS及稀土元素标记技术 质量标记细胞编码技术（2012年）进一步增加通道数，实现了对人外周血单核细胞信号转导动态变化、细胞-细胞通讯和信号转导变异性进行研究 ;单细胞光学成像 荧光显微镜（共聚焦、超分辨、全内反射、单层光、近场光学扫描等） 表面增强拉曼光谱 相干拉曼散射显微镜 基于瑞利散射的显微镜 基于吸收的显微镜 光声显微镜 基于干涉的显微镜等;单细胞电化学及其它成像技术 ;发展趋势;3.生物质谱与质谱成像 质谱在组学研究中的应用 ;质谱成像技术;发展趋势 1）改进富集技术，提高富集选择性 2）发展新型识别探针 3）敞开式质谱技术 4）将质谱技术与机器人技术和数字微流控技术进行对接 5）将质谱技术与其它光学技术联用 6）发展组学研究中质谱信号的自动确认系统和信息处理工具 ;4.核磁与活体成像 核磁共振在蛋白质研究中的应用;蛋白质动力学的研究; 磁共振成像在化学生物学中的应用;超灵敏磁共振成像;用于化学生物学研究的检测方法;J. Am. Chem. Soc. 130, 7224 (2008);动态监测药物介导细胞表面糖基表达变化;Chemiluminescence Imaging Assay;30;Nanoscale 6, 3150-3156 (2014);Dual quinone tagging for MALDI-TOF mass spectrometric quantitation of cysteine-containing peptide;MicroRNA: Function, Detection and Bioanalysis, Chem. Rev. 113(8), 6207–6233 (2013);Anal. Chem. 84, 4587–4593 (2012) Anal. Chem. 84(20), 8670–8674 (2012) Biosens. Bioelectron. 41, 348-353 (2013);Florescence imaging by graphene nanoribbon for cellular delivery of locked nucleic acid modified MB;QD-bound hybridization probe for detection of Pre-miR