BD FACSCalibur 的维护与保养.docVIP

BD FACSCalibur 的维护与保养 2.4.1 FACSCalibur 的每月维护 要求每个月进行一次系统管路，如果仪器处理样本量很大，或经常使用附着性染料（如PI、AO、TO 等），则需要增加管路清洗频率。 (1) 打开FACSCalibur 流式细胞仪。 (2) 断开鞘液筒连接。 (3) 旁路鞘液过滤器：鞘液过滤器上端的管路从SALINE FILTER 端口断开，将鞘液管路（白色）取下，连接到SALINE FILTER 端口上。 过滤器短路后，鞘液不经过滤器，直接从鞘液筒流入细胞流动池，再进入废液筒。 注意如果漂白液流经鞘液过滤器，会造成过滤器的损害，可能会造成流动池的堵塞，此时需要更换过滤器。 (4) 鞘液桶中装1：10 稀释漂白剂1-2L。 (5) 仪器处于RUN 状态，流速为HI，Falcon 样本管中加入1：10 稀释漂白剂3mL，加在上样针位置，清洗20-30 分钟。 (6) 移去装有1：10 稀释漂白剂的Falcon 样本管。 (7) 使用加有蒸馏水的鞘液桶和Falcon 样品管，同样方法清洗管路（重复第3-5 步）。 (8) 将装有鞘液的原鞘液筒恢复原位，连接好鞘液过滤器，上样针位置放盛有1mL 蒸馏水的样品管。 (9) 仪器选择Standby 模式。 此时，如果没有实验，可以关机。上样管位置的样本管中应盛有蒸馏水，防止上样针产生结晶。 如果需要使用FACSCalibur 获取样本数据，您应该先做PRIME。如果仪器停止使用一周以上，您应该每月做月清洗，并将液路更换为蒸馏水，使用仪器时再换成鞘液。 Contrad 70 溶液可以有效去除管路中的阻塞成分，如有必要，可以使用2%的Contrad 70 溶液代替1：10 稀释的漂白剂，清洗管路。 2.4.2 FACSCalibur 的定期维护 仪器部件不需要定期维护，但一些仪器部件有时需要做检查，如有必要，还需要清洗。检查清洗的频率视仪器使用频率而定。 鞘液过滤器 鞘液过滤器位于鞘液筒和废液筒之间，主要作用是过滤鞘液筒里的鞘液。如果发现FSC vs SSC图中的碎片增多，提示可能需要更换滤器了。建议鞘液过滤器3-4 个月更换一次，但是，是否更换滤器主要取决于仪器使用频率和使用的鞘液的质量。在做FACSComp 时，可以及时发现问题，如FSC噪音增大，提示过滤器需要更换。 (1) 打开压力阀，鞘液筒减压。 (2) 断开过滤器的鞘液进口连接和鞘液出口连接。 (3) 断开过滤器的空气调节管路。 此时可???取下鞘液过滤器，滤器的空气调节管留在仪器上。 (4) 将过滤器的基座拧开、取下，准备将基座连接在新的过滤器上。 弃掉旧的O 圈。 (5) 拔掉滤器上的鞘液出口管，准备将此管连接在新的过滤器上。 拔出口管时，会有鞘液流流出滤器。建议使用纸巾拔出口管。 (6) 换上新的O 圈，使用特氟龙胶带将基座和新的过滤器拧紧。 (7) 将鞘液出口管与新的过滤器连接好。 (8) 将新滤器重新放回仪器原位，接好接口连接。 (9) 重新连接好过滤器的空气调节管路。 (10) 鞘液筒加压。 (11) 仪器处于RUN 状态，使鞘液充满滤器，排除鞘液过滤器中的气泡。 如果见到滤器中有气泡，可以轻拍过滤器，使气泡位于滤器上端，打开连接鞘液过滤器和废液筒的管路开关，将气泡排出。气泡排除完毕，连接开关恢复原位。 (12) 弃去旧的鞘液过滤器。 (13) 在鞘液过滤器的外表标记更换日期。 空气滤网 空气滤网位于鞘液抽屉上方，主要作用是清洁空气，FACSCalibur 用过滤后的空气冷却激光。空气过滤网可以用吸尘器清洁或用水洗，然后可以空气烘干。空气滤网一定要完全干燥后，才能插回原处。 插回滤网时，应注意滤网边上的箭头指示标志。 分选管路 需要定期检查维护。 2.5 常见故障排除 在发生STATUS 异常情况时，可以使用CELLQuest 软件中Cytometer 菜单下的Status 工作窗口，帮助判断错误发生情况。 仪器处于NOT READY 状况 检查以下情况： 鞘液筒中的鞘液是否用完。 废液筒中的废液是否已装满。 开机需要5 分钟时间预热。 鞘液筒的液面检测器连接是否松动或未连接。 仪器处于STANDBY 状况（一起未加压） 如果仪器未加压，上样管放好后，虽然控制面板处于RUN 模式，但仪器仍未能达到READY 状况，此时仪器仍处于STANDBY 状况。这可能是由于鞘液筒盖漏气、压力阀未加压、样本管不能被加压等原因造成的压力问题。此时，样本不能良好地进入流动池，造成FACSCalibur 检测结果不好。 此时，检查以下情况： 鞘液筒是否漏气（盖紧鞘液筒盖）。 压力阀未加压。 样本管是否有破损。 上样针上的Bal seal 是否已磨损。 鞘液筒上的兰色接口是否连接好。 仪器噪音过大（鞘液过滤