第5章 转录和 与转录后加工（下） 药学分子生物学课件.pptVIP

第五章 转录与转录后加工 Part 2 ; 总RNA;一、原核生物转录的起始; ;二. 原核生物转录的延长;四.真核生物的转录;五、RNA生物合成抑制剂;第一节 转录的基本原理 第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构 第三节 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第四节 转录后加工及其机制;第四节 转录后加工及其机制 p169;真核生物从hnRNA到mRNA需如下过程： (1) 5′加帽； (2) 3′加尾； (3) 剪接 (4) 修饰：对某些碱基进行甲基化。;; 5’加帽成为m7G5’ppp5’NmpNp;mRNA5’帽子0首先转录初产物的5’端三磷酸脱下一个磷酸基团，与GTP通过形成5’-5’三磷酸二酯键连接（GpppN1），由S-腺苷甲硫氨酸（SAM）提供甲基，使碱基及核糖甲基化。 2. mRNA帽子的生理功能 a.为核糖体对mRNA的识别提供了信号。 b.增加mRNA的稳定性。 c.促进某些RNA的合成。 ;（二） 3’末端产生和多聚腺苷酸化;2. 3’末端???产生： 切离酶识别切点上游13-20bp AAUAAA motif，切点后GU-rich motif，在特异性因子CPSF（切割与多聚腺苷酸化专性因子）和CstF（蛋白切割激发因子）的协助下完成切离作用，产生3’末端。;3. 加Poly（A）尾巴 Poly（A）尾巴大约200nt。反应如下： 多聚核糖核苷酸+nATP 多聚核糖核苷酸(A)n+nPPi 需RNA末端腺苷酸转移酶(RNA terminal riboadenylate transferase)催化。 ;（三）mRNA的甲基化;1. 原核生物rRNA前体的切割;2. 真核生物rRNA前体的加工;3.rRNA前体的化学修饰两种修饰方式（在细菌和真核生物中都有，真核中修饰更加广泛）（1）将甲基基团加到核苷酸糖基的2’OH位（2）将尿苷酸变为假尿苷酸;三、tRNA前体的加工;tRNA的切割（原核和真核都有） ①核酸内切酶在tRNA两端切断 ②核酸外切酶RNAaseD识别CCA末端序列，一个个切除7个核苷酸 ③RNAaseP在5’端切断，RNAaseD除去3’末端的2个核苷酸 ④核苷修饰 甲基化、脱氨基、核苷酸替换、硫代;tRNA的修饰 tRNA分子中大约每10个核苷酸就有一个被修饰。 特点：范围广，种类多包括甲基化、脱氨基、核苷酸替换、硫代。 ;四、RNA的剪接（RNA splicing);（一）第I类内含子的自我剪接---rRNA的自我剪接 （self-splicing);剪接条件:Mg2+,pGOH,不需能量 剪接机制：内含子能折叠形成具核酶催化中心的空间结构，催化剪接;剪接过程：三次转酯反应;（二）第II类内含子的自我剪接（self-splicing);（三）第III类内含字的剪接----hnRNA的剪接; 1.hnRNA的结构特点①边界序列：符合GU-AG规则。内含子5’端总是GU，3’端总是AG。②分枝点序列：为Py N Py Py Pu A* Py，且具有2′-OH。;2.剪接机制：剪接体与磷酸酯键转移反应 剪接途径分为两步：;3.剪接体及组装GU-AG内含子剪接装置的核心成分包括一组snRNPs：U1、U2、U5、U4/U6，组装成剪接体（splicesome）;snRNAs and splice site; 酵母中约400个核tRNA基因中有40个不连续基因，每一个含有一个内含子，与反密码子相邻，长度大约14-46bp。 ;;（五）顺式和反式剪接;五、RNA编辑（RNA editing）RNA编辑：指转录后的RNA在编码区发生碱基的加入、丢失或转换等现象。90年代发现guideRNA（gRNA），它是一类新的小分子RNA，可以和mRNA分子被编辑的部分发生非常规的G-U互补配对，对mRNA前体分子的编辑起指导作用。;G U;哺乳动物RNA编辑举例;例：;本章应该掌握的内容