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病原生物学实习指导 主 编 刘 兵 史俊岩 主 审 周正任 罗恩杰 编 者 刘 兵 王 舰 史俊岩 郑兰艳 王雪莲 中国医科大学病原生物学教研室 2004年7月 前 言 根据国务院学位委员会的指示，将原医学微生物学与人体寄生虫学学科合并为病原生物学学科。国内多所医学院校先后都做了相应的调整，成立与组建病原生物学教研室，并将二门课合并，开设病原生物学课。按教育部的意见，新一轮教学改革最终要落实到培养适应新世纪需要的创建型、协作型、复合型人才，拓宽知识面。因此，我们联合大连医科大学、锦州医学院、沈阳医学院等四所院校编写了病原生物学教材，该教材将医学教育中《医学微生物学》、《人体寄生虫学》，感染性疾病和传染性疾病中病原学诊断及特异性防治部分整合在一起，适合培养创新性、开拓型人才。适合培养目标的需要。该教材已经通过教育部高等教育司的审批，被列为“面向二十一世纪课程教材”，由科学出版社出版，面向全国发行。 为配合病原生物学教材的使用，我们特地编写了《病原生物学实习指导》，供本科大学生学习病原生物学实验课之用。本教材由医学微生物学实习指导和人体寄生虫学实习指导两部分组成，通过实习课教学使学生了解和掌握《病原生物学》的基本实验技能操作和基本研究方法，同时也能获取相应的感性知识。为培养学生的思维能力和独立操作能力，在进行设计性实验课教学时，学生也能利用本实习指导作为工具，顺利地进行实验操作，以节省学生获取知识的时间。为此目的，对每项实验的目的及实际意义都有所交代，对实验结果的观察与分析，也予以必要的辅导。限于教学时数和条件，有些内容将以示教、电视或电影教学方式教学，这部分尤其需要加强复习，以弥补未能亲自操作之不足。有关实验课的改革设想，仍须不断地接受实践考验，发扬成绩克服缺点，以不断地充实和提高。 本实习指导由刘兵主编，全体实验课教师参加编写，周正任、罗恩杰教授全面审定，我们认为本实习指导符合教学实际，但仍难免有不当之处，欢迎予以批评指正。 中国医科大学病原生物学教研室 2004年7月 目 录 实习目的与要求………………………………………………………………1 实验室规则……………………………………………………………………1 显微镜的使用方法……………………………………………………………2 常用标本及观察方法…………………………………………………………3 绘图法…………………………………………………………………………3 医学微生物学实验…………………………………………………4 第一章 细菌形态学检查法…………………………………………………4 实验 1 不染色标本的观察…………………………………………………４ 2 革兰氏染色法………………………………………………………5 3 荚膜染色法…………………………………………………………8 4 鞭毛染色法…………………………………………………………9 5 芽胞染色法……………………………………………………… 10 第二章 细菌培养实验…………………………………………………… 11 实验 1 常用培养基制备………………………………………………… 11 细菌分离培养与纯培养…………………………………………12 细菌生化反应检查法……………………………………………16 细菌内毒素的检测（鲎试验）…………………………………19 第三章 消毒灭菌和药物敏感性实验…………………………………… 20 实验 1 常用消毒灭菌除菌器的使用…………………………………… 20 细菌的药物敏感性试验…………………………………………22 第四章 化脓性球菌的病原学检测……………………………………… 28 实验 1 化脓性球菌的病原学检测程序………………………………… 28 细菌血浆凝固酶试验……………………………………………30 细菌的触酶试验………………………………………………… 31 细菌耐热核酸酶试验…………………………………………… 31 肺炎球菌对小白鼠的传染试验………………………………… 32 抗链球菌溶血素“O”试验…………………………………… 33 第五章 肠道杆菌病原学检测…………………………………………… 35 实验 1 常用培养基制备………………………………………………… 35 病原性肠道杆菌的分离与鉴定方法……………………………37 肥达氏反应………………………………………………………40 第六章 厌氧性细菌实验……………………………………………………43 实验 1 厌氧培养法…………………………………………………………43 破