第二章 经典分离方法 现代分离科学与技术知识 .ppt

① 硅胶 软板：玻棒推行，厚度0.5-1 mm，制备TLC 1-3mm。 硬板：硅胶G或GF254 + 0.3-0.6%CMC-Na（1:3） 厚度0.2-0.3mm，110-105。C活化0.5-1h 避免气泡：a、顺一个方向研磨 b、加少量EtOH TLC板的制备 薄层层析 ② 氧化铝 软板同上 硬板：氧化铝G + 水（1:2）200。C活化3-4h—活性II 150。C活化4h—活性 III-IV。 ③ 聚酰胺板 10 g聚酰胺粉 + 85%甲酸 60 ml → 全溶 + 95%EtOH 30 ml → 铺板次日水洗甲酸，室温晾干。 ④ 纤维素板 2.5g（80目）+17 ml H2O → 铺板 → 放置12-24h → 80- 100。C 30 min a、组成：纤维素 （β 1-4苷键吡喃葡萄糖） b、性质： 干燥纸——6-7%的水，氢键与纤维素上-OH结合 水饱和的纸——20-35%的水 c、规格性能 ⑤层析纸 型号 标重 厚度 吸水性 灰分 展速 （g/m2） （mm） （30min水上升mm） （%） 1 90 0.17 150-120 0.08 快速 2 90 0.16 120-91 0.08 中速 3 90 0.15 90-60 0.08 慢速 4 180 0.34 151-121 0.08 快速 5 180 0.32 120-91 0.08 中速 6 180 0.30 90-60 0.08 慢速 层析纸 分离成败的关键：掌握大致规律，可避免不必要的大量摸索。 洗脱（展开）规律： 正相柱 展开剂极性越大，推进能力越强 展开剂极性越小，推进能力越弱 化合物极性越大，难推进 化合物极性越小，易推进 展开剂的选择 反相——与正相相反 酸性成分——酸性展开剂 碱性成分——碱性展开剂 Rf：0.2-0.8较合适. Rf值：原点到斑点（重心）的距离 / 原点到前沿 的距离 展开剂的选择 操作方法（点样——展开——显色） ① 点样 a、样品溶剂b.p低，控制斑点扩散。 e .g CH2Cl2、EtOAc、MeOH、EtOH、Me2CO b、软板注意不要带起吸附剂 c、原点直径2 mm左右，少量多次，毛细管角度45。， 一般0.2-0.5 mm，定量---微量进样器。 点样：过浓拖尾，过稀无点，可少量多次（吹风挥干） 未知浓度，可平行点不同量点。 ② 展开 注意：溶剂挥干,两相溶剂需要充分分层 克服边缘效应：a、饱和；b、二侧刮去2 mm 分上行、下行，软板平斜式。 ③ 显色 喷雾法 （软板-湿；硬板-干）,荧光观察法 蒸汽显色法（I2、NH3） 压板法（软板） 常用展开剂、显色剂(10%硫酸乙醇溶液) 第二节 经典柱色谱 吸附柱色谱 分配柱色谱 离子交换柱色谱 凝胶柱色谱 大孔树脂柱色谱 亲和柱色谱 手性柱色谱 吸附原理：吸附剂表面存在有效活性基团，如硅胶（Si—OH）、聚酰胺为氢键吸附，离子交换为诱导力。 展开时，溶剂与成分争夺吸附剂表面活性，产生吸附、解吸，解吸下的成分又与溶剂争夺吸附剂表面活性，故又产生吸附、解吸。这样吸附→解吸→再吸附→再解吸…的循环，不同的成分由于结构上的区别，表现出所受吸附力不同，被展开剂解吸的难易程度不同，而得以分离。成分的性质差异越大，分离效果越好。 分配原理:展开时，各组分在固定液与流动相之间进行连续分配,因各组分在固定液与流动相之间分配系数存在差异而得以分离. 色谱分离原理 a.普通硅胶 骨架表面存在Si—OH。多，则吸附力强， Si—OH吸水，则吸附力下降。