05 细菌感染的检测方法和防治原则.pptVIP

05 细菌感染的检测方法和防治原则.ppt

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第五章 细菌感染的检测方法与防治原则 第一节 细菌感染的检测方法 细菌感染的实验室诊断主要包括: 病原学诊断 ----以检测致病菌及其特异性抗原、核酸或代谢产物为目的(直接依据) 血清学诊断 ----以检测患者血清中特异性抗体为目的(间接依据) 细菌学诊断基本方法 2、荧光显微镜或电子显微镜等特殊检查 (二)细菌成分检测 抗原的检测:ELISA、IFA等 核酸的检测:核酸杂交、PCR技术、基因芯片等 细菌毒素的检测 内毒素的检测:鲎试验 外毒素的检测: ELISA 动物试验:主要用于分离鉴定致病菌,测定菌株产毒性等。 三、分离培养与鉴定 分离培养是确诊细菌感染性疾病最可靠的方法(“金标准”),所有标本原则上均应作分离培养获得纯培养后进一步鉴定。 主要鉴定内容: 培养特性:营养要求、生长条件和菌落特征等 形态学鉴定 生化反应 血清学鉴定:即用含有已知特异性抗体的免疫血清去检测标本中或分离培养物中未知的细菌,以确定致病菌的种或型。如玻片凝集试验。 药物敏感试验 测定标本中致病菌对药物的敏感程度。对指导临床用药及控制感染有重要意义。常用纸碟法和试管稀释法。 四、血清学诊断 采用已知的细菌或其特异性抗原,检测患者血清或其他体液中有无相应特异性抗体及其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断。 在血清学诊断中,最好采取患者急性期和恢复期双份血清标本。 结果:以抗体效价明显高于正常人水平或患者恢复期抗体效价比急性期升高≥4倍方有意义。 常用血清学诊断方法: 凝集试验 ----直接凝集试验、间接血凝试验、 乳胶凝集试验、冷凝集试验 沉淀试验 ----琼脂扩散法、对流免疫电泳 免疫标记技术 ----免疫荧光试验、ELISA、免疫印迹试验 第二节 细菌感染的防治原则 特异性免疫产生的方式 人工免疫 人工主动免疫 疫苗、类毒素 人工被动免疫 抗毒素、丙球 固有免疫 自然被动免疫 胎盘、初乳 自然主动免疫 患病、隐性感染 人工免疫:采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体,以增强宿主体的抗病能力。 一、人工主动免疫 人为地将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体,使机体主动产生特异性免疫力的一种防治微生物感染的措施。 常用制剂 疫苗 ----灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、 核酸疫苗、重组活载体疫苗、转基因植物疫苗和治疗性疫苗。 类毒素 1.灭活疫苗: 选用免疫原性强的细菌经人工大量培养后,用理化方法杀死而成。如伤寒、百日咳、霍乱等。 优点:易于保存。 缺点:接种剂量大;维持时间短;接种次数多;注射的局部和全身性副反应较大;不产生细胞免疫应答。 3.亚单位疫苗: 由细菌主要保护性免疫原组成的疫苗称为亚单位疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌的荚膜多糖,钩端螺旋体的外膜蛋白等。 4.核酸疫苗: 又称DNA疫苗、基因疫苗 是将能编码引起保护性免疫应答的病原体抗原基因片段插入到载体基因组中(如质粒、病毒等),再注入宿主体进行复制,以表达目的抗原,进而诱出机体针对该抗原的特异性免疫应答的新型疫苗。如乙肝疫苗。 重组活载体疫苗 转基因植物疫苗 治疗性疫苗等。 治疗性疫苗 是指能够打破慢性感染者体内免疫耐受,重建或增强免疫应答的新型疫苗。治疗性疫苗能在已患病个体诱导特异性免疫应答,消除病原体或异常细胞,使疾病得以治疗,是抗病毒、抗肿瘤的新治疗手段 该疫苗的接种对象是持续性感染患者或带菌者,可增强机体免疫力,促进患者康复。 类毒素: 外毒素经0.3~0.4%甲醛作用3~4周后,毒性消失仍保持免疫原性的制品。如白百破三联疫苗(DPT)是将白喉类毒素、百日咳死菌苗、破伤风类毒素混合而成。 二、人工被动免疫 给机体注射含特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等制剂,使机体即刻获得特异性免疫力的过程,以治疗或紧急预防感染。 常用制剂 1、抗毒素: 一般用细菌类毒素或外毒素多次免疫马后采血,从血清中提取免疫球蛋白精制而成。抗毒素能中和相应的外毒素,阻断其毒性作用。例如用于白喉、破伤风等疾病。 注射前需做皮肤试验。 应早期、足量注射。 2、免疫球蛋白 ----丙种球蛋白、胎盘球蛋白 (麻疹、

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