7白细胞计数、计数质控、分类.pptVIP

* * 1.白细胞显微镜计数法： 原理、试剂、方法、计算、有核红细胞的校正、参考值。 2.白细胞显微镜计数法的质量控制： 经验控制、常规考核标准、变异百分数评价法、两差比值评价法。 3.显微镜白细胞分类计数： 方法 稀乙酸将血液中的红细胞破坏，然后计数白细胞。 一. 原理 二. 试剂 白细胞稀释液 冰乙酸 2.0ml 10g/L 亚甲蓝 数滴 蒸馏水 加至100ml 溶解RBC;固定WBC核蛋白 使WBC核着色 三. 方法 1.白细胞稀释液0.38ml＋血20ul。 2.混匀，充入计数池，静置2～3min。 3.低倍镜计数四角4个大方格内白细胞数。 四. 计算 WBC／L＝所数WBC数/4×10×20×106 ＝所数WBC数／20×109 五. 注意事项 1.若WBC＜3×109/L，应扩大计数范围 (8大方格)或取双倍血，结果除以2。 2.有核红细胞增多时的校正。 WBC/L＝Z×100／(100＋Y) Z：未校正前白细胞数 Y：计数100个WBC时所见有核RBC数 某患者白细胞计数为11.0×l09/L， 但分类100个白细胞时遇到有核红 细胞25个，请问该患者白细胞计 数结果应如何报告？ 六. 参考值 成人： (4～10)×109/L 新生儿： (15～20)×109/L 6月～2岁：(11～12)×109/L 常规考核标准（RCS） 变异百分数评价法 经验控制 两差比值评价法 血涂片上WBC/HP WBC 2～4 （4～7）×109/L 4～6 （7～9）×109/L 6～10 （10～12）×109/L 10～12 （13～18）×109/L 血涂片上WBC密度与WBC数量关系 (粗略估计结果准确性) RCS＝(WBC最大－WBC最小)/WBC平均×100％ WBC ≤4×109/L， RCS＜30% WBC (4.1～14.9)×109/L，RCS＜20% WBC ≥15×109/L， RCS＜15% 据WBC在计数池4大格内的分布情况而定。 (充池质量的评价) 某标本做白细胞计数时，四个大 方格所计数的白细胞数分别为42、 45、38、35，请评价此计数结果。 WBC/L＝（42+45+38+35）/20×109 ＝ 8.0×109 RCS＝（45-35）/40×100%＝25% 此计数结果不合格，重新充池再计数。 质量得分＝100－(V×2) V＝ Xi－Xm / Xm×100 V:变异百分数，Xi:测定值，Xm:靶值 评价：90分以上为优； 80～89分为良； 70～79分为中； 60～69分为及格； ＜60分为不及格 (适用于技术考核) r= X1-X2 /√X1+X2 r：两差比值 X1、X2：同一标本短时间内计数2次， 分别在计数区域中所数细胞数。 质量得分＝100－(r×20.1) ( DC ) 一、血涂片的制备 二、血涂片的染色 （一）瑞氏染色法（Wright染色法） （二）吉姆萨染色法（Giemsa染色法） （三）瑞氏-吉姆萨复合染色法 三、白细胞分类计数 一、瑞氏染色法（Wright’s stain） 二、吉姆萨染色法（Giemsa’s stain） 三、瑞氏-吉姆萨复合染色法 对胞浆和中性颗粒染色较好，对胞核稍差。 对胞浆和中性颗粒染色较差，对胞核和寄生虫着色较好。 取二者之长，染色效果好。 瑞氏染液是瑞氏染料溶于甲醇而成： ＊ 细胞受色原理： 物理吸附作用；化学亲和作用。 ＊ 染色易受pH影响： 偏酸环境染色偏红，偏碱环境偏蓝。 ＊ 瑞氏染料:酸性染料伊红和碱性染料 美蓝组成的复合染料。 (1)美蓝(亚甲蓝): 阳离子，碱性染料 常为氯化美蓝（M＋Cl－） (2)伊红(曙红): 阴离子，酸性染料 常为伊红化钠（Na＋E－） (3)M+Cl－＋Na+E－ 水中 M E↓＋NaCl (4)甲醇:有机溶剂;固定细胞;增加染色效果。 M E 甲 醇 M＋ ＋ E－ 美蓝易氧化为天青。 瑞氏染料 *