亮氨酸改善非酒精性脂肪性肝病的机制分析-mechanism analysis of leucine improving nonalcoholic fatty liver disease.docxVIP

中文摘要 亮氨酸改善非酒精性脂肪性肝病的机制研究3. 亮氨酸对 NAFLD 模型大鼠瘦素通路的影响：16 周实验结束时，测定大鼠血 清瘦素水平。取下丘脑免疫组化法测定其瘦素受体表达。Western blot 法进一步检测 白色脂肪组织中瘦素受体表达以及 JAK2、STAT3 和 SOCS3 等瘦素信号通路相关蛋 白的表达。结果：1. NAFLD 模型的建立及亮氨酸对肝脏脂肪变性的直接作用：（1）干预 16 周后，4 组大鼠的体重、平均摄食量和主要脏器指数之间无显著性差异。（2）肝组织病理 切片观察到高脂组大鼠肝脏呈现明显的脂肪变性，证实本研究中高脂喂养建立了 NAFLD 的大鼠模型。亮氨酸的干预则逆转了脂肪变性。同时，亮氨酸的干预也显著 降低了高脂组升高的大鼠血清 ALT、AST 水平。2. 亮氨酸对 NAFLD 模型大鼠糖脂代谢、氧化应激以及炎症因子的影响：（1） 亮氨酸组较高脂组 FINS 水平均显著降低，但 3 个亮氨酸组之间无显著性差异；亮氨 酸的干预显著降低了高脂组 HOMA-IR 指数。（2）干预 16 周后，4 组大鼠的肝糖原 之间的差异无显著性， 3 个剂量的亮氨酸干预都显著降低了大鼠血清 TC、TG 和 LDL-C 水平，3.0%和 4.5%亮氨酸显著升高肝脏 T-SOD 和 GSH-Px 水平，4.5%亮氨酸 还显著降低了肝脏 MDA 水平。（3）高脂组大鼠肝组织中 SREBP1 蛋白表达量由于 亮氨酸的干预显著降低，而肾周白色脂肪组织中的 PPARγ 蛋白表达量则在亮氨酸的 作用下显著上升。3. 亮氨酸对 NAFLD 模型大鼠瘦素通路的影响：（1）单纯高脂组和添加亮氨酸3 组的血清瘦素水平分别为 2.31±0.23, 1.69±0.26, 1.87±0.27 和 1.91±0.29 ng/mL，亮氨酸组显著低于高脂组，且亮氨酸组之间无显著性差异。（2）免疫组化染色结果 显示，4 组大鼠肝组织瘦素受体的相对含量为 22.70±3.21，54.33±3.06, 39.50±2.08 和 36.00±3.51。亮氨酸组的相对含量均显著高于高脂组，其中 1.5%亮氨酸组效果最为显 著。和肝脏相似，亮氨酸组的大鼠下丘脑的瘦素受体也高于对照组。（3）亮氨酸的 干预显著升高了高脂组大鼠下丘脑中瘦素受体蛋白和肾周白色脂肪组织中 JAK2 和 STAT3 的表达量。降低了 SOCS3 的表达量。其中，1.5%亮氨酸组效果最好。结论：1. 亮氨酸能够改善肝脏功能以及肝脏脂肪变性，从而具有改善非酒精性脂肪性亮氨酸改善非酒精性脂肪性肝病的机制研究中文摘要肝病的作用。2. 亮氨酸改善了高脂喂养的大鼠的糖脂类代谢、提高抗氧化能力、降低血清及 组织中的炎性因子。3. 亮氨酸降低血中瘦素水平，增加中枢和外周组织瘦素受体和 JAK2、STAT3 等瘦素信号通路相关的蛋白表达，同时降低起负反馈调节作用的 SOCS3 蛋白表达。 提示亮氨酸能改善瘦素抵抗。4. 总之，亮氨酸能够改善非酒精性脂肪性肝病，其可能机制是抑制了对肝脏的 二次打击，即改善胰岛素抵抗和瘦素抵抗、提高机体抗氧化能力、降低炎性因子。本 研究侧重于亮氨酸预防非酒精性脂肪性肝病及其机制的探讨，但从指标来看，亮氨酸 同样对 2 型糖尿病、心血管疾病、代谢综合征的危险因子也起到了预防作用。关键词：非酒精性脂肪性肝病；亮氨酸；脂代谢；抗氧化能力；炎性因子；胰岛 素抵抗；瘦素通路作者： 袁雪薇 指导教师： 秦立强教授英文摘要亮氨酸改善非酒精性脂肪性肝病的机制研究Effect of Leucine on Improving Nonalcoholic Fatty Liver Disease and the Underlying MechanismsAbstractThe global prevalence of nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is increasing at an alarming rate. NAFLD is a component of the metabolic syndromes and its underlying mechanisms is still not completely clear. Day put forward “two-hit”theory, including insulin resistance, leptin resistance and oxidative stress. There are no ideal drugs for prevention and treatment. Research showed that branched chain amino acids