化学蛋白组学与青蒿素机理研究.docVIP

化学蛋白组学与青蒿素机理研究 化学蛋白组学与青蒿素机理研究 2015年，中国科学家屠呦呦因发现青蒿素而获诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素的发现为治疗疟疾做出了革命性贡献，然而其精确的抗疟机理几十年来却依然不甚明了。最近，科学家利用化学蛋白组学的手段更加清晰地阐明了青蒿素特异高效的抗疟机理，从分子层面解开了青蒿素抗疟的神秘面纱。 　　疟疾是一种由寄生虫感染而引起的恶性疾病。世界卫生组织估计每年约有2亿人感染，66万人死于疟疾。绝大多数受害者是不到5岁的儿童，受到疟疾威胁的人口则多达32亿人。疟原虫感染人体后会在短时间内破坏人体内80%的红细胞，威胁患者生命。 　　在众多的治疗疟疾药物中，青蒿素是最为有效的一种。青蒿素是从一种称为黄花蒿的植物中提取的天然化合物。30多年前，中国科学家屠呦呦最早发现并证明青蒿素在治疗疟疾中的重要作用。青蒿素的发现和广泛使用使得每年数百万疟疾感染者免于死亡的威胁。虽然青蒿素作为一种最有效的抗疟药物得到广泛使用，但其抗疟机制仍不明了。更令人担忧的是，最新的研究还发现了对青蒿素产生抗药性的病例，一旦疟原虫对青蒿素产生耐药性并大面积传播，必将给人类带来一场大灾难。因此，研究青蒿素内在的抗疟机制对于控制青蒿素的抗药性及开发新型抗疟药物有着重要意义。 　　疟疾与青蒿素 　　人们往往以为狮子和鲨鱼是凶猛残暴的动物，然而据研究，每年死于这些猛兽的仅有几十人。蚊子是人们熟悉又讨厌的昆虫，大家绝对不会想到，世界上最危险的动物居然是小小的蚊子。有些蚊子携带着具有传播性的疟原虫，人被这些蚊子叮咬后，会染上致命的疾病——疟疾。 　　青蒿素是目前最强有效的抗疟药物。它能够在几小时内起效，并快速杀灭人体血细胞内的寄生虫，被认为是抗击疟疾的最后一道防线。青蒿素是一种特殊的具有过氧桥结构的倍半萜内酯类化合物，为无色针状晶体，易溶于醋酸乙酯、氯仿丙酮、乙醚等溶剂，但几乎不溶于水，相对分子质量282.33，是从菊科植物黄花蒿中分离出来的。近年来，青蒿素及其多种衍生物被广泛应用于疟疾的临床治疗，其中包括双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿乙醚，它们的化学结构中都带有具活性的过氧桥结构。 　　主流的青蒿素抗疟机理假说 　　青蒿素在其被发现并广泛运用几十年后，其准确的作用机制依然没有定论。在东南亚某些地区，已发现一些青蒿素逐步耐药的迹象，一旦青蒿素耐药并大面积传播，必将给人类带来一场大灾难。 　　青蒿素抗疟机理的研究有两个难点：第一，青蒿素是一个前体药物，本身没有很活跃的性质，需要通过其他物质的激活，才能变成高杀伤力的药物，但对于激活剂及其来源是什么，一直都有很多争论。第二，青蒿素被激活后，是通过结合哪些生物分子来杀灭疟原虫的，也一直是悬而未决的问题。 　　在青蒿素如何被激活的问题上，游离的二价铁离子和血红素都曾被认为是青蒿素活化所需要的二价铁离子的来源，但是相关研究的结果却互相矛盾。关于青蒿素的作用靶点，可从众说纷纭中归纳为以下几种假说。 　　（1）血红素结合模型。梅什尼克（S.Meshnick）早期在质谱研究中观察到血红素被青蒿素烷基化的结合产物，并在体外实验中发现青蒿素与血红素的反应产物能氧化红细胞膜上的巯基。类似的青蒿素烷基化血红素的结果，在其他实验室的研究中也得到了验证。之后，罗伯特（A.Robert）在用青蒿素治疗处理后的被鼠疟感染的小鼠的脾脏和尿液中，也分离鉴定到青蒿素与血红索的烷基化产物。但随后的实验揭示青蒿素对血红素的烷基化并不是其抗疟作用所必需的。 　　（2）肌浆内质网钙ATP酶靶点理论。该理论最早由克里什纳（S.Krishna）提出。他根据青蒿素在化学结构上与毒胡萝卜素（thapsigargin）的相似性，及后者能特异地结合并抑制肌浆内质网钙ATP酶（PfATP6），推测青蒿素可能会对PfATP6有潜在抑制作用。他利用在非洲爪蟾卵母细胞中表达PfATP6来进行试验，发现青蒿素的确对这类蛋白有抑制作用。此理论曾风靡一时，但后来越来越多的学者质疑该理论：有些实验不能被重复，或者认为PfATP6即使是青蒿素的靶蛋白，但也不一定是最重要的靶蛋白。 　　此外，还有一些其他蛋白被认为是青蒿素的靶蛋白，如转移控制肿瘤蛋白，氯喹抗性转运蛋白，消化泡上的膜转运蛋白等，但都没有足够证据证明这些蛋白与青蒿素抗疟作用有直接关系。 　　（3）线粒体模型理论。有研究发现，青蒿素能抑制酿酒酵母在非发酵培养基中的生长，而对在发酵培养基中培养的酿酒酵母的生长没有明显影响，这种现象暗示青蒿素与线粒体功能有密切联系。电子传递链的组分也显示出对青蒿素的敏感性，但最近的一些研究结果表明，在青蒿素处理过的疟原虫中，线粒体的形态与功能并没有受到严重影响。 　　以上这些假说是几十年来几代科学家利用生物化学、细胞生物学等方法建立的青蒿素机理模型，但它们都不能很好地解释青蒿素对疟原虫的