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活血通筋胶囊质量标准研究 　　关键词 活血通筋胶囊 薄层鉴别 4-甲氧基水杨醛 高效液相色谱法 　　活血通筋胶囊由香附、红花、香加皮、狗脊、络石藤、伸筋草、槲寄生等7味中药组成，具有活血止痛、散瘀通筋的功效，用于急性伤筋、肿胀疼痛的治疗。为了更好地控制产品质量，本实验采用HPLC测定香加皮中的4-甲氧基水杨醛的含量，并且对红花、香附、香加皮进行薄层鉴别，为活血通筋胶囊的质量标准提供了定性和定量的检测方法，建立了该制剂的质量标准，结果比较满意。 　　 　　1 仪器与试药 　　 　　活血通筋胶囊，由活血通筋胶囊研发课题组提供，仪器为岛津10ATvp高效液相色谱仪，依利特ODS-C18柱。4-甲氧基水杨醛：由Sigma-Aldrich Inc提供（16,069-5，供含量测定用），红花对照药材：由中国药品生物制品检定所提供。 　　 　　2 方法与结果 　　 　　2．1 薄层色谱鉴别[1]：方法如下。 　　2．1．1 香附的薄层鉴别：取本品粉末及阴性样品各30g，置2L烧瓶中，加入500ml水，用水提挥发油装置提取2h后，乙酸乙酯定容至5ml，作为样品溶液和阴性溶液；另取香附药材1g加乙醚30ml冷浸1h，滤过，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml溶解，作为药材溶液；另取?-香附酮0．1ml，用乙酸乙酯定容至1ml。吸取样品溶液和阴性溶液各10μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（92∶5∶5）为展开剂展开，然后取出、晾干。在254nm紫外光下检视，其中样品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，可见相同颜色的斑点，而阴性样品，则没有对照品斑点出现。 　　2．1．2 红花的薄层鉴别：取本品及阴性样品各25g，加50ml的85％丙酮，冷浸3h，滤过，继续加20ml的85％丙酮，冷浸1h，滤过，合并两次滤液，55℃下0．1MPa真空浓缩干。用10ml的70％乙醇超声溶解，上130gNKA大孔吸附树脂柱（3．5cm×20cm），用400ml水进行洗脱，弃去水洗液，然后用500ml的30％乙醇洗脱，收集该洗脱液，55℃下0．1MPa真空浓缩干，用85％丙酮溶解并定容至5ml，作为样品溶液和阴性溶液。另取红花对照药材0．5g，放入5ml容量瓶中，加85％丙酮至刻度，放入振荡机中中速振摇30min后静置1h，吸取上清液，重复以上操作两次，合并三次上清液定容至5m1，作为对照药材溶液。吸取样品溶液和阴性溶液各10μl，对照药材溶液10μl，分别点于同一聚酰胺薄膜板上，以甲醇-3．8％盐酸（1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。在365nm紫外光下检视，发现样品溶液色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，可见对应黄色斑点，而阴性样品没有对照品斑点出现。 　　2．1．3 香加皮的鉴别：取本品及阴性样品各5g，加甲醇30ml超声30min后，滤过，挥干，用甲醇定容至2ml，作为样品溶液和阴性溶液；另取香加皮药材0．5g，加甲醇15ml后超声10min，滤过，挥干，用甲醇定容至1ml，作为药材溶液；另取对照品4-甲氧基水杨醛0．5mg，用甲醇1ml溶解定容，作为对照品溶液。吸取样品溶液和阴性溶液各10μl，药材溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（92∶5∶5）为展开剂，展开，取出，晾干。喷二硝基苯肼乙醇试液，放置10min后，发现样品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，明显可见相同斑点，而阴性样品没有对照品斑点出现。 　　2．2 4-甲氧基水杨醛的含量测定[2]：方法如下。 　　2．2．1 对照品溶液的制备：精密称取真空干燥至恒重的4-甲氧基水杨醛对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含15μg的溶液，作为对照品溶液。 　　2．2．2 供试品溶液的制备：取本品的内容物，混匀，精密称取0．5g，置100ml圆底烧瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，置水浴中回流2h，冷却并晾干，称重并用甲醇补足相同重量，摇匀，用0．45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 　　2．2．3 色谱柱及流动相的选择：选用ODS-C??18?柱，以甲醇-水（48∶52）为流动相 　　2．2．4 测定波长的选择：将4-甲氧基水杨醛对照品甲醇溶液于紫外分光度仪上，在波长200~400nm范围内测得其吸收峰为λ??max?=277nm，本标准选择λ??max?=277nm。 　　2．2．5 线性关系的考察[3]：精密称取4-甲氧基水杨醛对照品适量，分别加甲醇溶解并稀释成2μg/m1、7．5μg/ml、15μg/ml、37μg/ml和75μg/ml的对照品溶液，每一浓度标样进样20μl，以4-甲氧基水杨醛的进样量为横坐标（X），以4-甲氧基水杨醛面积