流式细胞术简介 [课件].pptVIP

流式细胞术简介 For FCM Training 流式细胞术 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量 流式细胞仪系统 简介 通过流式细胞仪我们可以得到以下信息 - 相对细胞大小 - 相对细胞颗粒密度和内部复杂度 - 染色过细胞的相对荧光强度 流式细胞仪的光信号 散射光信号 荧光信号 前向角散射光 ——FSC Forward Angle Light Scatter 侧向角散射光——SSC 散射光 散射光能被用来区分不同细胞群体的基本形态上的差异 - 通常使用“散点图”来看散射光信号 - 散点图上的一个点就代表一个细胞颗粒的数据 散点图——Dot Plot Review Question 2. 荧光信号 荧光素吸收激光能量 荧光素将吸收能量释放，转换为 振动能和热能 释放较入射光波长更长的光量子 荧光素与特异抗体结合 荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强 荧光检测器 Two-Color Cell Analysis 双色荧光散点图 现代流式细胞仪包括 液流系统 聚焦细胞以供检